ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，mALB Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，mALB Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。
mALB Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：
- 標(biāo)本的采取和保存。
- 試劑的準(zhǔn)備
- 加樣。
- 保溫。
- 洗滌。
- 顯色和比色。
- 酶標(biāo)比色儀。
- 結(jié)果判斷。
將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。mALB Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，mALB Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，mALB Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。
脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。
mALB Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyE002Hu 人CREB結(jié)合蛋白(CREBBP)檢測試劑盒 ELISA Kit for CREB Binding Protein (CREBBP) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyC489Hu 人膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)檢測試劑盒 ELISA Kit for Ferroportin (FPN) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyG516Hu 人復(fù)制啟動因子1(REPIN1)檢測試劑盒 ELISA Kit for Replication Initiator 1 (REPIN1) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyH547Hu 人核因子相關(guān)κB結(jié)合蛋白(NFRkB)檢測試劑盒 ELISA Kit for Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein (NFRkB) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyQ572Hu 人Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)檢測試劑盒 ELISA Kit for Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyP122Hu 人無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5B(WNT5B)檢測試劑盒 ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5B (WNT5B) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyU491Hu 人含動力蛋白重鏈域蛋白1(DNHD1)檢測試劑盒 ELISA Kit for Dynein Heavy Chain Domain Containing Protein 1 (DNHD1) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyB790Hu 人唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素8(SIGLEC8)檢測試劑盒 ELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 8 (SIGLEC8) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyC631Hu 人異粘蛋白(MTDH)檢測試劑盒 ELISA Kit for Metadherin (MTDH) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyD665Hu 人乙酰*乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)檢測試劑盒 ELISA Kit for AHZtyl Coenzyme A AHZtyltransferase 2 (ACAT2) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyH983Hu 人線粒體甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移酶(GPAM)檢測試劑盒 ELISA Kit for GlyHZrol-3-Phosphate Acyltransferase, Mitochondrial (GPAM) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyF212Hu 人炭疽熱毒素受體2(ANTXR2)檢測試劑盒 ELISA Kit for Anthrax Toxin ReHZptor 2 (ANTXR2) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyL935Hu 人再生蛋白1(NEO1)檢測試劑盒 ELISA Kit for Neogenin 1 (NEO1) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyC578Hu 人Pim-1原癌基因(PIM1)檢測試劑盒 ELISA Kit for Pim-1 Oncogene (PIM1) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyN637Hu 人Pim-3原癌基因(PIM3)檢測試劑盒 ELISA Kit for Pim-3 Oncogene (PIM3) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyP797Hu 人Pim-2原癌基因(PIM2)檢測試劑盒 ELISA Kit for Pim-2 Oncogene (PIM2) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyG077Hu 人嘌呤能受體P2X7(P2RX7)檢測試劑盒 ELISA Kit for Purinergic ReHZptor P2X, Ligand Gated Ion Channel 7 (P2RX7) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyJ809Hu 人*3/*5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)檢測試劑盒 ELISA Kit for Tyrosine 3/Tryptophan 5 Monooxygenase Activation Protein Zeta (YWHAz) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyD841Hu 人磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)檢測試劑盒 ELISA Kit for Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific (PLCg2) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyF975Hu 人雙特異性磷酸酶5(DUSP5)檢測試劑盒 ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
xyG438Hu 人鈣結(jié)合蛋白(CALB)檢測試劑盒 ELISA Kit for Calbindin (CALB) 檢測范圍：9.375-1000pg/ml
