貨號:WT-E5990【兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒實驗步驟】由上海蔚霆生物有限公司提供并免費ELISA檢測試劑盒代測,快速檢測一周內(nèi)出結(jié)果,是進行科研實驗理想的選擇。專業(yè)供應(yīng)進口原裝ELISA試劑盒,并擁有完善的售后服務(wù),由熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù)來為您解答。如有需要及疑問請與我們的銷售人員
產(chǎn)品詳細信息
【兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒實驗步驟】等ELISA檢測試劑盒基本屬性:
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
特點
(1)、高效、靈敏、特異的抗體;
(2)、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
(3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
(4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
(5)、節(jié)省實驗經(jīng)費。
【兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒實驗步驟】 ELISA檢測試劑盒成分組成:
(1)、預(yù)包被板:抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化96T
(2)、酶標(biāo)記抗體:(30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化0.4mLx1
(3)、標(biāo)準(zhǔn)品:重組小鼠白介素-60.5mLx2
(4)、EIA緩沖液:含1%BSA,0.05%吐溫20BPS30mLx1
(5)、標(biāo)記抗體稀釋液:含1%BSA,0.05%吐溫20BPS12mLx1
(6)、顯色劑:TMB底物液15mLx1
(7)、終止液:1N硫酸12mLx1
(8)、濃縮洗滌液:(40倍濃縮)含1%BSA,0.05%吐溫20BPS50mLx1操作說明1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)酶標(biāo)儀(450nm)微移液管及其吸嘴量筒及燒杯去離子水冰箱(4°C)坐標(biāo)紙(log/log)吸水紙試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋)溫育箱(37°C±1°C)洗瓶(用于洗板)一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)
【兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒實驗步驟】技術(shù)原理:
(1).抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2).結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3).酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4).受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5).此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6).加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)
【兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒實驗步驟】說明書
(1)檢測的結(jié)果沒有吸光度值或吸光度值很低
可能引起的原因有試劑盒已過有效期、使用的試劑盒內(nèi)容物不是同一個批次的、沒加入酶標(biāo)記物、試劑盒的內(nèi)容物沒有充分的回溫、孵育的溫度太低等,相對應(yīng)的解決辦法是更換成在有效期以內(nèi)的試劑盒、使用同~個批次的試劑盒的內(nèi)容物、按照試劑盒說明書中的步驟進行操作、將試劑盒的內(nèi)容物充分的回溫后再進行操作、在實驗操作的整個過程中請仔細觀察恒溫箱的溫度。
(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性不好,或平行性不好(雙孔對照孔的OD值差別很大),或出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象
可能引起的原因有酶標(biāo)板孔間相互污染、洗板后未能盡快進行下一步操作、添加樣品或其它試劑時操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標(biāo)板孔問加入的試劑量不同,相對應(yīng)的解決辦法是加樣時請小心勿將液體濺人另一孔中,人工洗板時也請小心,勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時進行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入,切記勿將槍頭接觸到板孔內(nèi),吸取不同試劑瓶中的液體時就要更換一次槍頭、確認孵育環(huán)境不透光,蓋板膜將酶標(biāo)板密封好、使用已校正過的微量加樣器,如將*次加入液體時槍頭上留有一滴的液體滴下,那么將以后槍頭上留有的液體也滴下,以保證加入液體體積的*性。
(3)吸光度值偏
高可能引起的原因有孵育的溫度過高、反應(yīng)的時間過長。相對應(yīng)的解決辦法是調(diào)整孵育環(huán)境的溫度,如無法調(diào)整室內(nèi)的溫度,請將顯色時間適當(dāng)?shù)目s短、控制反應(yīng)時間。
(4)陰性樣本的吸光度值低
于陽性吸光度值可能引起的原因是出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象或酶標(biāo)板孔中的試劑未充分的混合。解決的辦法是注意操作的方法,注意洗滌時的方法、加完試劑后可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30s,混勻液體。