背景介紹：Zeta-globin is an alpha-like hemoglobin. The zeta-globin polypeptide is synthesized in the yolk sac of the early embryo, while alpha-globin is produced throughout fetal and adult life. The zeta-globin gene is a member of the human alpha-globin gene cluster that includes five functional genes and two pseudogenes. The order of genes is: 5' - zeta - pseudozeta - mu - pseudoalpha-1 - alpha-2 -alpha-1 - theta1 - 3'.

訂購(gòu):或（成）

中文名稱：血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體

英文名稱：Anti-HBZ antibody

血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體-胞內(nèi)抗體直接標(biāo)記

1、將消化下來(lái)的細(xì)胞用1 X PBS洗兩遍，然后用0.5 mL 0.5%BSA的 1 X PBS重懸。

2、加入等量37℃預(yù)熱的4%多聚甲醛固定細(xì)胞，37℃孵育10分鐘。

3、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍并用1ml 90%的冰甲醇重懸細(xì)胞，放置冰上30分鐘。

4、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。

5、3%BSA封閉。

6、樣本標(biāo)記：100μl 0.5%BSA的 1 X PBS內(nèi)細(xì)胞量為0.5-1X106個(gè)。

a)不標(biāo)記細(xì)胞樣本

b)同型對(duì)照

c)一抗

7、以抗體說(shuō)明書(shū)上的比例加入抗體，冰上孵育30分鐘。

8、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。

9、加入500μl 1 X PBS上機(jī)檢測(cè)。

D、胞內(nèi)抗體間接標(biāo)記

1、將消化下來(lái)的細(xì)胞用1 X PBS洗兩遍，然后用0.5 mL 0.5%BSA的 1 X PBS重懸。

2、加入等量預(yù)熱的4%多聚甲醛固定細(xì)胞，37℃孵育10分鐘。

3、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍并用1ml 90%的冰甲醇重懸細(xì)胞，放置冰上30分鐘。

4、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。

5、樣本標(biāo)記：100μl 0.5%BSA的 1 X PBS內(nèi)細(xì)胞量為5X105-1X106個(gè)。

a)不標(biāo)記細(xì)胞樣本

b)單獨(dú)二抗

c)同型對(duì)照+二抗

d)一抗+二抗

6、以抗體說(shuō)明書(shū)上的比例加入抗體，冰上孵育30分鐘。

7、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。

8、0.5%BSA的 1 X PBS重懸細(xì)胞后加入等體積10%山羊血清，室溫孵育15分鐘。

9、加入熒光標(biāo)記二抗，放置冰上，避光條件下孵育30分鐘。

10、用0.5%BSA的1 X PBS洗兩遍。

11、加入500μl 1 X PBS上機(jī)檢測(cè)。

規(guī)格：0.1ml/0.2m

濃度：1mg/1ml

抗體來(lái)源：本公司抗體有兔來(lái)源和鼠來(lái)源等

克隆類型：兔來(lái)源為多抗，鼠來(lái)源為單抗

產(chǎn)品類型：一抗

血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體簡(jiǎn)單介紹：

別 名：HBAZ; HBAZ_HUMAN; HBZ 2; HBZ; HBZ2; Hemoglobin subunit zeta; Hemoglobin zeta; Hemoglobin zeta chain; Zeta globin; Zeta-globin. 

此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售，相關(guān)標(biāo)記有：Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記

直接免疫熒光標(biāo)記法 本方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，易于分析，適用于同一細(xì)胞群多參數(shù)同時(shí)測(cè)定。雖然直標(biāo)抗體試劑成本較高，但減少了間接標(biāo)記法中較強(qiáng)的非特異熒光的干擾，因此更適用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。

間接免疫熒光標(biāo)記法 本方法費(fèi)用較低，二抗應(yīng)用廣泛，多用于科研標(biāo)本的檢測(cè)。但由于二抗一般為多克隆抗體，特異性較差，非特異性熒光背景較強(qiáng)，易影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以標(biāo)本制備時(shí)應(yīng)加入陰性或陽(yáng)性對(duì)照。另外，由于間標(biāo)法步驟較多，增加了細(xì)胞的丟失，不適用測(cè)定細(xì)胞數(shù)較少的標(biāo)本。

血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體流式抗體選擇標(biāo)準(zhǔn)

1. 滿足抗體選擇的基本條件

靶蛋白特異性：確定目的細(xì)胞的特異性表面標(biāo)記或者胞內(nèi)標(biāo)記，知道您要檢測(cè)什么。

種屬：嚴(yán)格按照待測(cè)樣本種屬選擇抗體來(lái)源，流式抗體基本無(wú)法進(jìn)行種屬間交叉反應(yīng)。

應(yīng)用領(lǐng)域：可用于流式實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明書(shū)中明確標(biāo)注經(jīng)FC實(shí)驗(yàn)測(cè)試，有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)圖和用量說(shuō)明。

抗體克隆號(hào)：一般選擇參考文獻(xiàn)上提到的克隆；同一抗體多個(gè)克隆號(hào)的情況下，可以選擇熒光標(biāo)記種類zui多的那個(gè)克隆。

2. 確定流式細(xì)胞儀的參數(shù)配置

在設(shè)計(jì)流式方案前，先確定需要使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)的型號(hào)，對(duì)該儀器的參數(shù)配置要了解以下幾個(gè)方面信息：

激光器：常見(jiàn)的流式細(xì)胞儀有488nm和635nm/633nm兩個(gè)激光器，但有些機(jī)器在購(gòu)買時(shí)因某些原因，只裝了一個(gè)488nm激光器，所以需要注意型號(hào)相同的機(jī)器也未必激光配置相同。

濾光片：也就是有幾個(gè)檢測(cè)通道，這決定了你zui多可以同時(shí)檢測(cè)幾個(gè)指標(biāo)。

儀器的具體型號(hào)：有助于再次確定檢測(cè)通道。因?yàn)橥粋€(gè)熒光在不同的流式細(xì)胞儀上檢測(cè)，有時(shí)候檢測(cè)通道也是不一樣的。

3. 熒光的選擇

選擇直標(biāo)還是間標(biāo)：待測(cè)抗原表達(dá)高的盡量選擇直標(biāo)抗體，待測(cè)抗原表達(dá)豐度低的要考慮選間標(biāo)*標(biāo)記標(biāo)抗體。

熒光強(qiáng)弱：熒光本身有強(qiáng)弱之分，可視抗原表達(dá)強(qiáng)弱及分群情況選擇合適的熒光。如抗原表達(dá)弱或分群不明顯的建議選擇強(qiáng)熒光例如：PE、APC；反之，抗原表達(dá)強(qiáng)或分群明顯的建議選擇zui常用的弱熒光例如FITC即可（常用熒光強(qiáng)弱排序程度為：PE>APC>PE-cy5/Cy5>PerCP/PerCP-Cy5.5/Cy5.5>FITC。

4. 多色熒光搭配的原則

多色分析方案中熒光抗體的選擇和搭配，會(huì)受到很多因素的制約：

檢測(cè)通道不能沖突：每個(gè)檢測(cè)通道只能選擇1種熒光素，各通道之間的熒光素可以隨意搭配（如FL1選擇了FITC標(biāo)記的抗體，就不能再選擇Alexa Fluor488標(biāo)記的抗體；而同組實(shí)驗(yàn)的其余抗體選擇PE或者APC標(biāo)記，都是可以隨意組合的）；

熒光強(qiáng)弱：所選各種熒光素光譜的重疊應(yīng)當(dāng)盡量減少，否則將會(huì)導(dǎo)致較大的補(bǔ)償。zui常用的4色熒光搭配是：FITC、PE、PerCP/PerCP-Cy5.5、APC；

5. 同型對(duì)照抗體的選擇

同型對(duì)照（Isotype Control），用于消除由于抗體非特異性結(jié)合到細(xì)胞表面而產(chǎn)生的背景染色，是真正意義上的流式陰性對(duì)照，流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)*的一項(xiàng)。同型對(duì)照是使用與一抗相同種屬來(lái)源、相同亞型及亞鏈、相同熒光標(biāo)記的免疫球蛋白，也要求使用相同劑量。

純化級(jí)別抗體：如果是純化的一抗加熒光標(biāo)記的二抗，那么應(yīng)該選擇與一抗相對(duì)應(yīng)的同型對(duì)照抗體（如樣品管為：純化的CD3+PE標(biāo)記的二抗+樣本；則對(duì)照管為：純化的同型對(duì)照+ PE標(biāo)記的二抗+樣本）。

血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。

免疫熒光雙重染色熒光雙染或多重染色是指將帶有不同熒光素標(biāo)記的抗體孵育在同一張切片上，鏡下觀察時(shí)將不同的顏色組合在一起，將不同的抗原表達(dá)情況一起呈現(xiàn)出來(lái)，這樣分析多個(gè)抗原的關(guān)聯(lián)性更客觀、更直接。

熒光雙染也有直接法和間接法。直接法是使用帶有不同熒光素標(biāo)記的兩個(gè)抗體同時(shí)孵育后觀測(cè)；間接法需要用到兩個(gè)不同種屬來(lái)源的一抗（例如一個(gè)鼠源抗體，一個(gè)兔源抗體），后面要選擇與一抗相對(duì)應(yīng)的二抗同時(shí)需要帶有不同的熒光素標(biāo)記（例如FITC標(biāo)記山羊抗小鼠和Cy3標(biāo)記山羊抗兔），間接法需要同時(shí)兼顧一抗和二抗的種屬關(guān)系，避免出現(xiàn)相互的交叉反應(yīng)。

血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

Anti-APRG1抗體,三號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框抗體
Anti-APRT抗體,腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶抗體
Anti-phospho-AQP2(Ser256),磷酸化水通道蛋白2抗體
Anti-ARF1抗體,ADP核糖基化因子1抗體
Anti-ARF3抗體,ADP核糖基化因子3抗體
Anti-ARA9抗體,乙型肝炎病毒X相關(guān)蛋白2抗體
Anti-ARF5抗體,ADP核糖基化因子5抗體
Anti-ARFBP1抗體,ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白抗體
Anti-ARFGAP3抗體,ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白1抗體
Anti-ARFRP1抗體,ADP核糖基化因子相關(guān)蛋白1
Anti-Argininosuccinate Lyase抗體,琥珀酸裂解酶抗體
Anti-Arginyl tRNA synthetase抗體,精氨酰tRNA合成酶抗體
Anti-Argonaute 3抗體,真核翻譯起始因子2C3抗體
Anti-Argonaute 4抗體,真核翻譯起始因子2C4抗體
Anti-ARHGAP15抗體,Rho GTP酶激活蛋白15抗體
Anti-ARID1B抗體,抑癌基因結(jié)合蛋白ARID1B抗體
Anti-ARIH2抗體,E3連接酶蛋白ARIH2抗體
Anti-ARFL1抗體,ADP核糖基化樣因子1抗體
Anti-ARL4抗體,ADP核糖基化因子樣蛋白4抗體
Anti-ARP2抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3抗體