中文名稱：無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA小提試劑盒(1.5～5mL)
英文名稱：Endotoxin-free Plasmid Mini Kit(1.5-5mL)
產(chǎn)品規(guī)格：50次
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0163393
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒采用菌體內(nèi)毒素清除劑，在質(zhì)粒提取前就把細胞壁上的內(nèi)毒素清除掉，*避免了目前通用的先提取DNA+內(nèi)毒素混合物，再從中純化質(zhì)粒DNA的弊端。用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA，內(nèi)毒素的污染濃度低，適合于轉(zhuǎn)染等對內(nèi)毒素的污染敏感的實驗。 試劑盒特點： 操作簡單，只在經(jīng)典的柱式質(zhì)粒DNA提取前，增加菌體內(nèi)毒素清除一步。 去內(nèi)毒素效果好，處理一次可以去除99%以上的內(nèi)毒素。 質(zhì)粒丟失少，產(chǎn)率只比柱式質(zhì)粒低5～10%，效果好于先提質(zhì)粒DNA，再用液相內(nèi)毒素清除劑處理的方法。 DNA可以直接用于轉(zhuǎn)染等實驗。 儲存條件： 常溫運輸及保存，有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低溫運輸和保存。 使用方法： 一、用菌體內(nèi)毒素清除劑清除E.coli細胞壁上的內(nèi)毒素。 收集1.5～5mL E.coli飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，得到細菌沉淀。 加入1mL菌體內(nèi)毒素清除劑溫和混勻后10000～12000rpm離心1分鐘，棄上清（含內(nèi)毒素）。 一次洗滌（1～2步）可以去掉90%以上的內(nèi)毒素，如果需要，可以再重復(fù)上述洗滌操作步驟3次，得到的菌體可以直接進入后續(xù)的質(zhì)粒DNA提取步驟。 二、從無內(nèi)毒素的E.coli中提取質(zhì)粒DNA 先將全部RNase A溶液全部加入到柱式質(zhì)粒溶液A中，搖勻后再取用，未用完的柱式質(zhì)粒溶液A好在4℃保存。 在第3步所得菌液中加入250μL柱式質(zhì)粒溶液A，用槍頭充分吹打使菌體重懸（此步在冰上操作效果更佳）。 注意：細胞未充分懸浮會影響后續(xù)操作，可以使用漩渦振蕩器幫助混勻或使用Tip吸頭吹打沉淀至*混勻。 加入250μL柱式質(zhì)粒溶液B（如果溶液B有沉淀，用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用），溫和反復(fù)顛倒混勻4～6次，看到溶液變粘即可，然后冰上放置不過4～5分鐘。 注意：此步處理不能過5分鐘，否則DNA的堿損傷比較嚴(yán)重。同時千萬不要劇烈振蕩，否則基因組DNA斷裂產(chǎn)生的片段非常容易污染質(zhì)粒DNA。溶液B用后需要將蓋擰緊存放，否則空氣中的二氧化碳會進入溶液，形成碳酸，中和溶液B中的NaOH，降低其效率）。 加入350μL冰上預(yù)冷的柱式質(zhì)粒溶液C，反復(fù)顛倒混勻4～6次，可見白色沉淀物產(chǎn)生，然后冰上放置至少5分鐘。 高轉(zhuǎn)速（12000rpm以上）4℃離心5分鐘，小心將上清液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。由于此時的溶液比重較大，有時候出現(xiàn)沉淀漂浮是正?，F(xiàn)象，取上清時避開漂浮的沉淀即可。如果此步的離心在室溫進行，更容易出現(xiàn)沉淀物漂浮的現(xiàn)象。 靜置2分鐘以讓質(zhì)粒DNA與吸附柱充分結(jié)合，此步十分重要。 室溫12000rpm離心1分鐘，棄收集管中的廢液。 加入500μL的通用洗柱液，室溫12000rpm離心1分鐘，棄收集管中廢液。 注意：通用洗柱液中含乙醇，用后需要將蓋擰緊存放，否則乙醇會揮發(fā)。 重復(fù)上步1次。 室溫12000rpm離心1分鐘，甩干殘留液體。此步不能省略，否則殘留乙醇會影響DNA的后續(xù)使用（如DNA上樣時不能沉淀到加樣孔中）。 將離心吸附柱置于一個新的1.5mL塑料離心管（自備）中，加入30～100μL 65～80℃預(yù)熱的DNA洗脫液2.0，室溫放置2分鐘。常溫的DNA洗脫液2.0也可以用于洗脫，但產(chǎn)量稍微有所降低。 室溫12000rpm離心1分鐘，離心管底溶液即質(zhì)粒DNA。 注：由于的吸附柱結(jié)合DNA能力較，如果再加適量DNA洗脫液2.0到離心吸附柱中，往往還能洗脫下很多質(zhì)粒DNA（相當(dāng)于次洗脫的20～30%），但注意不要使用上步得到的DNA洗脫液2.0來洗脫。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。 7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。 8、結(jié)果分析
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
植物高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒
真菌/酵母細胞線粒體粗提分離試劑盒
真菌/酵母細胞活性線粒體分離試劑盒
真菌/酵母細胞高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒
純化線粒體蛋白質(zhì)濃度定量測定試劑盒
植物類黃測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Tropisetron 分子式：C17H21ClN2O2 度：98.0%
植物可溶性糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Pemetrexed di 中文名：二鈉 分子式：C21H23N5Na2O6
植物激素脫落酸elisa 植物激素脫落酸試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 植物激素脫落酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa（進口分裝），產(chǎn)品別名：植物激素脫落酸試劑盒、植物激素脫落酸eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Testosterone 中文名： 分子式：C19H28O2
植物激素脫落酸(ABA)elisa Tropicamide 1508-75-4 分子式：C17H20N2O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
植物激素脫落酸（ABA）ELISAKit Troxerutin 中文名： 分子式：C33H42O19 度：98.0%
無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA小提試劑盒(1.5～5mL)吉馬酮 HPLC≥98% 20mg 犬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)試劑盒 Dog heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit
吉妥辛 HPLC≥98% 20mg 英文名稱humanf-E3ELISAKIT人游離雌三醇(f-E3)規(guī)格：96T/48T
HPLC≥98% 100mg 初級離心柱DNA回收試劑盒20
加蘭他敏 HPLC≥98% 20mg Rathemeoxygenase2,HO-2elisa大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa規(guī)格：96T/48T
HPLC≥98% 20mg 小鼠中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)elisa ，英文名： ITIH5 ELISA Kit
查爾酮 HPLC≥98% 5mg 犬白介素18(IL-18)ELISA檢測試劑盒CanineIerleukin18,IL-18ELISAKIT 96T/48T
甲基當(dāng)藥寧 HPLC≥98% 10mg 犬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 Canine Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit
HPLC≥98% 20mg 英文名稱humanf-β-HCGELISAKIT人游離β絨毛膜(f-β-HCG)規(guī)格：96T/48T
甲基黃連堿 HPLC≥98% 20mg 創(chuàng)傷弧菌(Vibriovulnificus)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20
甲基蓮心堿 HPLC≥98% 20mg Rathepaticlipase,HLelisa大鼠肝脂酶(HL)elisa規(guī)格：96T/48T
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
