河南專業(yè)科研細(xì)胞實(shí)驗技術(shù)服務(wù)Tunel檢測實(shí)驗-效勝實(shí)業(yè)
效勝實(shí)業(yè)河南專業(yè)科研細(xì)胞實(shí)驗技術(shù)服務(wù)Tunel檢測實(shí)驗
本公司開展了HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫組化,免疫熒光,WB .PCR.透射電鏡,掃描電鏡,細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗服務(wù),*,周期短;流式檢測大致分為流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞周期檢測、細(xì)胞增殖檢測、細(xì)胞因子檢測;TUNEL檢測的原理:
細(xì)胞在發(fā)生凋亡時,會激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時抽提DNA進(jìn)行電泳檢測,可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?;蚪MDNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標(biāo)記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細(xì)胞凋亡的原理。
TUNEL檢測(石蠟切片)
取下適當(dāng)?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間,4攝氏度保存運(yùn)輸;
TUNEL檢測(冰凍切片)
取下的新鮮組織應(yīng)立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運(yùn)輸,固定好的切片應(yīng)于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測;
TUNEL檢測(細(xì)胞爬片)
細(xì)胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運(yùn)輸,盡快用于檢測;