訂購產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：副流感病毒通用PCR檢測試劑盒

英文名稱：Parainfluenza Virus(PIV)RTPCR

試劑盒準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                     毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                     毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                      1份

反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

測試副流感病毒通用PCR檢測試劑盒過程請注意：

① 建議所有的物品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。

② 試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號的試劑不得混用。

③ 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

④ 酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

副流感病毒通用PCR檢測試劑盒注意事項(xiàng)

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

相關(guān)PCR產(chǎn)品:

海魚分枝桿菌PCR檢測試劑盒
消化鏈球菌通用PCR檢測試劑盒
淋病奈瑟菌PCR檢測試劑盒
潰瘍分枝桿菌PCR檢測試劑盒
溶血性曼氏桿菌PCR檢測試劑盒
滑液支原體PCR檢測試劑盒
火雞支原體PCR檢測試劑盒
牙齦卟啉單胞菌PCR檢測試劑盒
牛分支桿菌卡介苗PCR檢測試劑盒
牛分枝桿菌PCR檢測試劑盒
牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測試劑盒
牛支原體PCR檢測試劑盒
牛眼莫拉氏菌PCR檢測試劑盒
牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒
犬小孢子菌PCR檢測試劑盒
犬新孢子蟲PCR檢測試劑盒
犬血支原體PCR檢測試劑盒
狂犬病病毒固定毒株pcr檢測試劑盒
狂犬病病毒街毒株P(guān)CR檢測試劑盒