島津 InertSep MPC混合型強(qiáng)陽(yáng)離子交換SPE柱
GL Sciences 公司是以生產(chǎn)色譜耗材起家的公司，而InertSep 系列的固相萃取小柱作為其 主要產(chǎn)品線 之一，已有50多年的研發(fā)生產(chǎn)歷史。GL Sciences福島工廠榮獲標(biāo)準(zhǔn)化組織ISO9001：2008質(zhì)量管理體系認(rèn)證，體系中包含固相萃取小柱，色譜柱，散裝填料等。目前，InertSep系列的固相萃取小柱在食品安全領(lǐng)域，環(huán)境領(lǐng)域已有廣泛的應(yīng)用。
InertSep MPC固相萃取小柱，是在苯乙烯—二乙烯苯基體上，導(dǎo)入強(qiáng)陽(yáng)離子交換基與反相基團(tuán)，同時(shí)具有強(qiáng)離子交換作用和疏水性相互作用，廣泛用于乳品中三聚氰胺、動(dòng)物源性食品中β—受體激動(dòng)劑、磺胺類等前處理，相當(dāng)于市面上的MCX，PCX等產(chǎn)品。
應(yīng)用舉例1—乳品中三聚氰胺的檢測(cè)
1. 前處理
預(yù)處理：
液態(tài)奶：取原料乳5g，于50ml離心管中，分別加入500ul，10ppm的標(biāo)準(zhǔn)液（保證每kg原料乳中各含1mg標(biāo)樣）、15ml 0.1%三氯yi酸溶液和5ml乙腈，渦旋1min， 超聲20min，4500r/min離心15min。取出上清液，用0.1%三氯yi酸定容至25ml容量瓶中。振蕩均勻，從中取5ml，再加入5ml水作為上樣液。
奶粉：取奶粉5g，于50ml離心管中，分別加入500ul，10ppm的標(biāo)準(zhǔn)液（保證每kg奶粉中各含1mg標(biāo)樣），15ml 0.1%三氯yi酸溶液和5ml乙腈，渦旋1min，超聲1h，放置冰箱中2h，4500r/min離心15min。取出上清液，用0.1%三氯yi酸定容至25ml容量瓶中。振蕩均勻，從中取5ml，再加入5ml水作為上樣液。
Ps：由于奶粉不含水份，相對(duì)與液態(tài)奶，脂類與其他添加成分可能更多，因此增加超聲時(shí)間及冷卻步驟，以保證蛋白沉降*。
凈化：
固相萃取小柱：
InertSep MPC 3ml/60mg 貨號(hào)5010-27121或WondaSep MPC 3ml/60mg 貨號(hào)5010-MPC
活化：3ml甲醇和5ml水
上樣：前處理后，備用的上樣液
淋洗：3ml水、3ml甲醇
洗脫：6ml 5%氨水-甲醇
濃縮復(fù)溶：40度氮?dú)獯蹈桑尤?/span>1ml 3Mmol/L醋酸銨溶液：乙腈=20：80的流動(dòng)相，濾膜過(guò)濾后，HPLC分析。
2. 色譜分析
色譜柱：Inertsil HILIC 5um 4.6*250mm
流動(dòng)相：A—2 mmol/L醋酸銨溶液 B—乙腈
梯度表如下：
表1 梯度表
時(shí)間 | 2Mmol/L醋酸銨溶液 | 乙腈（%） |
0 | 20 | 80 |
10 | 20 | 80 |
10.01 | 50 | 50 |
20 | 50 | 50 |
20.01 | 20 | 80 |
30 | 20 | 80 |
流速：1.0ml/min 柱溫：40℃ 進(jìn)樣量：10ul 檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm
儀器：Shimadzu LC-20A
3. 基質(zhì)加標(biāo)回收率結(jié)果
三次平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果（基質(zhì)加標(biāo)濃度均為1mg/kg）：
—液態(tài)奶
表2 液態(tài)奶加標(biāo)回收率
名稱 | 基質(zhì)加標(biāo) | |
回收率% | RSD% | |
三聚氰胺 | 98.38 | 0.89 |
應(yīng)用舉例2—動(dòng)物性食品中磺胺類藥物殘留的測(cè)定
1. 前處理（以豬肉為例）
預(yù)處理：
取勻漿后的豬肉5g，于50ml離心管中，加50ul，10ppm的混標(biāo)，乙酸乙酯20ml，渦旋1min，
4000r/min 離心5min，取上清液于100ml雞心瓶中，殘?jiān)右宜嵋阴?span style="font-family:times new roman">20ml，重復(fù)提取一次，合并兩次提取液。
雞心瓶中加入4ml 0.1mol/L的鹽酸溶液，旋轉(zhuǎn)濃縮至少于3ml，轉(zhuǎn)移到10ml離心管中。
分別用2ml 0.1mol/L的鹽酸溶液和3ml 正己烷清雞心瓶，轉(zhuǎn)移到同一離心管中，渦旋30s，3000r/min 離心5min，棄正己烷，再次用正己烷3ml洗雞心瓶，轉(zhuǎn)移到同一離心管中，渦旋30s，3000r/min 離心 5min，棄正己烷，取下層液備用
凈化：
固相萃取小柱：
InertSep MPC 3ml/60mg 貨號(hào)5010-27121或WondaSep MPC 3ml/60mg 貨號(hào)5010-MPC
活化：2ml甲醇、2ml 0.1mol/L的鹽酸溶液
上樣：將上述備用液上柱，流速1ml/min
淋洗：2ml 0.1mol/L鹽酸溶液
洗脫：4ml 5%氨化甲醇洗脫（5%氨化甲醇：5ml氨水，加甲醇定容至100ml），
濃縮復(fù)溶：將洗脫液40度氮吹干，加0.1% 甲酸：乙腈溶液（87：13）1ml溶解殘留物， 過(guò)濾待分析。
2. 色譜分析
色譜柱：Inertsil ODS-3 5um 4.6*250mm（GB 29694-2013）
流動(dòng)相：A—0.1%甲酸水溶液 B—乙腈
梯度表如下：
表1
時(shí)間 | A（%） | B（%） |
0 | 83 | 17 |
5 | 83 | 17 |
10 | 80 | 20 |
22.3 | 60 | 40 |
22.4 | 10 | 90 |
30 | 10 | 90 |
31 | 83 | 17 |
48 | 83 | 17 |
流速：1.0ml/min 柱溫：25 進(jìn)樣量：100 ul 檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm
儀器：Shimadzu LC-20A
3. 基質(zhì)加標(biāo)回收率結(jié)果
三次平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果（基質(zhì)加標(biāo)濃度為0.1mg/kg豬肉）：
名稱 | 空白加標(biāo) | 基質(zhì)加標(biāo) | ||
回收率 % | RSD % | 回收率 % | RSD % | |
磺胺吡啶 | 96.65 | 2.02 | 87.24 | 4.81 |
磺胺甲基嘧啶 | 96.08 | 1.85 | 97.28 | 5.26 |
磺胺二甲基嘧啶 | 93.84 | 2.51 | 89.00 | 7.30 |
磺胺甲氧噠嗪 | 92.45 | 3.68 | 87.23 | 4.62 |
磺胺間甲氧嘧啶 | 98.27 | 1.76 | 88.10 | 4.37 |
磺胺氯噠嗪 | 90.94 | 2.11 | 88.21 | 3.80 |
磺胺甲噁唑 | 98.28 | 1.94 | 92.48 | 3.51 |
苯酰磺胺 | 88.29 | 1.37 | 85.16 | 4.11 |
磺胺二甲氧噠嗪 | 90.17 | 2.04 | 89.65 | 3.65 |
島津 InertSep MPC混合型強(qiáng)陽(yáng)離子交換SPE柱
