一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞 |
細胞別稱 | |
種屬來源 | 小鼠 |
商品貨號 | XG-X11152 |
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 3T6-Swiss albino細胞是于1963年從分解的瑞士小鼠胚胎中建立的，3T6-Swiss albino細胞能分泌膠原質(zhì)和透明質(zhì)酸。檢測表明，3T6-Swiss albino細胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
年齡（性別） 胚胎
組織來源 胚胎；成纖維細胞
細胞類型 自發(fā)永生化細胞
生物安全等級 1
倍增時間 ~15 hours
基因表達情況 collagen; hyaluronic acid
保藏機構 ATCC; CCL-96 DSMZ; ACC-202 ECACC; 86120801
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
c、棄上清，沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，最后放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
d、待細胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
c、用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
d、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
雞肺動脈平滑肌細胞 | 人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA檢測試劑盒 |
大鼠氣管平滑肌細胞 | 豬睪酮(T)試劑盒ELISA |
大鼠支氣管上皮細胞 | 倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA Kit |
兔骨髓間充質(zhì)干細胞 | 蝦虹彩病毒PCR試劑盒 |
兔肌腱干細胞 | 斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR試劑盒 |
雞前脂肪細胞 | 傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒 |
人肺動脈成纖維細胞 | 多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒 |
小鼠肺成纖維細胞 | 阿菲波菌屬通用PCR試劑盒 |
豬成骨細胞 | 組鏈球菌PCR試劑盒 |
大鼠肺成纖維細胞 | 足馬杜拉分枝菌PCR試劑盒 |
兔肺微血管內(nèi)皮細胞 | (同馬皰疹病毒3型)馬疹病病毒PCR試劑盒 |
雞外周血淋巴細胞 | (同病毒)綿羊膿皰病毒PCR試劑盒 |
人肺微血管平滑肌 | 足馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒 |
小鼠支氣管上皮細胞 | 3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞斑點氣單胞菌PCR檢測試劑盒 |
豬骨髓間充質(zhì)干細胞 | 組織蛋白mei抗體ELISA試劑盒 |
