Live或Dead 可固定死細(xì)胞染色試劑盒 NIR熒光是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的染色細(xì)胞的試劑盒，我們的Live or Dead™ Fixable Dead Cell Staining Kit *NIR Fluorescence*是一套用于標(biāo)記細(xì)胞的工具，用于細(xì)胞功能的熒光顯微鏡研究。細(xì)胞的有效標(biāo)記為在空間和時(shí)間背景下研究細(xì)胞事件提供了有利的方法。這個(gè)特殊的試劑盒設(shè)計(jì)用紅外熒光均勻標(biāo)記固定的哺乳動(dòng)物細(xì)胞，用于紅色激光激發(fā)的流式細(xì)胞儀應(yīng)用。 該試劑盒使用專有的紅色熒光染料，在與細(xì)胞成分結(jié)合后更加熒光。 試劑盒中使用的熒光染料被激發(fā)，其中紅色（635nm）在775nm處具有熒光（APC / CY7通道）。 該試劑盒提供所有必需組件和優(yōu)化的細(xì)胞標(biāo)記協(xié)議。 它是保存特定細(xì)胞熒光圖像的優(yōu)秀工具，也可用于熒光流式細(xì)胞儀應(yīng)用。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供的Live或Dead 可固定死細(xì)胞染色試劑盒 。
染色樣品示例
概述
1.用HHBS制備樣品（0.5 mL /分析）
2.替換為HHBS
3.將Stain It™NIR熒光添加到細(xì)胞懸浮液中
4.在室溫或37°C下染色細(xì)胞20-60分鐘
5.洗凈細(xì)胞
6.固定細(xì)胞（可選）
7.使用適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)/發(fā)射濾光片，用流式細(xì)胞儀和/或熒光顯微鏡檢查樣品
注意：在開始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍所有組分
操作步驟
表1.用于流式細(xì)胞術(shù)分析的熒光光譜特性和激發(fā)光
| 貨號(hào) | 描述 | Ex(nm) | Em(nm) | 激發(fā)光源（nm） |
| 22500 | 藍(lán)色熒光，405nm激發(fā) | 410 | 450 | 405 |
| 22501 | 綠色熒光，405nm激發(fā) | 408 | 512 | 405 |
| 22502 | 橙色熒光，405nm激發(fā) | 398 | 550 | 405 |
| 22599 | 紅色熒光優(yōu)化用于流式細(xì)胞術(shù) | 523 | 617 | 488 |
| 22600 | 藍(lán)色熒光 | 353 | 442 | 335 |
| 22601 | 綠色熒光 | 498 | 521 | 488 |
| 22602 | 橙色熒光 | 547 | 573 | 561或488 |
| 22603 | 紅色熒光 | 583 | 603 | 561 |
| 22604 | 深紅色熒光 | 649 | 660 | 633 |
| 22605 | 近紅外熒光 | 749 | 775 | 633 |
1.使用1X Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的無(wú)疊D化鈉和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液制備細(xì)胞。
2.用HHBS或您選擇的無(wú)疊氮化物和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液洗滌細(xì)胞一次。
3.以5-10×106 / mL的濃度在HHBS或您選擇的無(wú)疊氮化物和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液中重懸細(xì)胞。
4.將1 µL 500X Stain It NIR熒光儲(chǔ)備液添加到0.5 mL細(xì)胞/測(cè)定中，并充分混合。
5.在室溫或37°C，5％CO2的培養(yǎng)箱中避光保存20-60分鐘。 注意：應(yīng)根據(jù)不同細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)確定的染色濃度和孵育時(shí)間。
6.洗滌細(xì)胞兩次，然后用HHBS或您選擇的緩沖液重懸細(xì)胞。
7.根據(jù)需要固定細(xì)胞（可選）。
8.使用適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)/發(fā)射濾光片，使用流式細(xì)胞儀和/或熒光顯微鏡分析細(xì)胞（參見(jiàn)表1）。
