我司全程提供細(xì)胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
人胚腎細(xì)胞:293 [HEK-293] | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞系 | BJ-X96321 |
商品介紹:
名稱 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)
別稱 Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293
種屬 人類
年齡(性別) 胎兒
組織來源 胚胎腎;以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報道中指出,293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點(diǎn)的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
生物安全等級 2
生長培養(yǎng)基 MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~24-30小時
凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO?,5%溫度:37℃
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
受體表達(dá)情況 vitronectin
注意事項 該細(xì)胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán),為正?,F(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/p> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
22RV1 (人前列腺癌細(xì)胞) 人前列腺癌細(xì)胞:22RV1 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
293T [HEK-293T](人胚腎細(xì)胞) 人胚腎細(xì)胞:293T [HEK-293T] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
3T3-L1 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞:3T3-L1 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
4T1 (小鼠乳腺癌細(xì)胞) 小鼠乳腺癌細(xì)胞:4T1 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞) 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞:6T-CEM 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
769-P (人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞:769-P 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
786-O [786-0] (人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞:786-O [786-0] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
95-D [PLA-801D] (人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞:95-D [PLA-801D] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
A172 (人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞:A172 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
A2780 (人卵巢癌細(xì)胞) 人卵巢癌細(xì)胞:A2780 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
A-375 (人惡性黑色素瘤細(xì)胞) 人惡性黑色素瘤細(xì)胞:A-375 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
A-431 (人表皮癌細(xì)胞) 人表皮癌細(xì)胞:A-431 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
A549 [A-549] (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞:A549 [A-549] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
A-673 (人橫紋肌肉瘤細(xì)胞) 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞:A-673 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
A9 (小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞:A9 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
AAV-293 (人胚腎細(xì)胞) 人胚腎細(xì)胞:AAV-293 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
Acc-2 (人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞) 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞:Acc-2 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白抗體
beta-Actin (Loading Control) β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內(nèi)參抗體)
beta-Amyloid 1-42 (CT) β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
beta Amyloid 1-16 β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體
beta Amyloid 1-28 β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體
ARIP2a 激活素受體2A抗體
Aquaporin 5 水通道蛋白5抗體
beta Amyloid 1-40 β淀粉樣肽(1-40)抗體
beta Amyloid 1-42 β淀粉樣肽(1-42)抗體
APOA1 載脂蛋白A1抗體
Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體
Ankyrin B 錨定蛋白B抗體
ATP7A 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體
Amphetamine(2A3F)
ASMTL ASMTL蛋白抗體
TRA16 激素受體相關(guān)蛋白16抗體
人胚腎細(xì)胞:293 [HEK-293] beta-Amyloid 1-40 (CT) β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體
ASB13 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體
beta Amyloid 31-35 β淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體