產(chǎn)品概述
臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱(chēng)臺(tái)盼蘭、錐蟲(chóng)藍(lán)、曲利苯藍(lán),是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性和細(xì)胞的存活率。臺(tái)盼藍(lán)染色是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色而正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。而巨噬細(xì)胞能夠吞噬臺(tái)盼藍(lán),故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。另外需要注意的是,凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。
臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色只需3-5min,操作簡(jiǎn)單。
產(chǎn)品信息
形態(tài) | 液體 |
規(guī)格 | 100mL |
溶劑 | 0.85% NaCl溶液 |
臺(tái)盼藍(lán) | 4 g/L |
儲(chǔ)存條件 | 2℃~30℃ |
運(yùn)輸條件 | 室溫 |
有效期 | 36個(gè)月 |
使用說(shuō)明
1、收集細(xì)胞(貼壁細(xì)胞可能需要用和/或 EDTA 消化),1000 r/min 離心 5min,棄上清,制備單細(xì)胞懸液,并做適當(dāng)稀釋。
2、向細(xì)胞懸液中加入0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液,臺(tái)盼藍(lán)終濃度為0.04%,室溫染色3 min(染色時(shí)間可以稍微延長(zhǎng),但不宜超過(guò)10min) 。
3、吸取少量經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),在顯微鏡下可以觀察到,死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大,無(wú)光澤;活細(xì)胞則不著色并保持正常形態(tài),有光澤。
4、計(jì)算活細(xì)胞存活率
細(xì)胞存活率(%)= 活細(xì)胞總數(shù)/(活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù))×99%
注意事項(xiàng)
1、染色時(shí)間不能太長(zhǎng),否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色,使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差;
2、細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),通常要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品計(jì)數(shù)不少于 500 個(gè)細(xì)胞;
3、臺(tái)盼藍(lán)有潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn),操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。
4、本產(chǎn)品長(zhǎng)時(shí)間存放可能會(huì)出現(xiàn)少量顆粒狀沉淀,可37℃水浴約10分鐘以充分溶解沉淀,沉淀溶解后即可正常使用。
5、本產(chǎn)品僅用于科研或進(jìn)一步研究使用,不用于診斷和治療。