需要高生產(chǎn)率高性能的蛋白質(zhì)組分析

高性能2D Micro-HPLC系統(tǒng)可進(jìn)行復(fù)雜肽組分的分離，其靈敏度和分離度都可超過目前的要求。將一維中的陽離子交換色譜與二維中的毛細(xì)管反相色譜進(jìn)行結(jié)合，并利用6個捕集柱，可獨(dú)立優(yōu)化不同的分析條件。這也使大量消化物中痕量肽的分離分析成為可能，因此可作為具有低顯示水平的未知蛋白質(zhì)探索的極為有效工具。配置了電噴霧離子源接口（ESI）的質(zhì)譜儀具有的性能及靈敏度。

特征

1. 在二維凝膠電泳中不能分析的蛋白質(zhì)在此儀器中可進(jìn)行分析。

高離子蛋白和疏水性蛋白質(zhì)可在線分析。

2. 低顯示水平的蛋白質(zhì)可進(jìn)行高分離度和高靈敏度的自動分析。

蛋白質(zhì)消化物可置于自動采樣器中進(jìn)行自動分析。其靈敏度可滿足痕量肽分析要求，而在2-D凝膠中是不可檢測的。

3. 在線樣品捕集和隨后RPHPLC進(jìn)行的自動化脫鹽可確保穩(wěn)定的分析。

陽離子交換柱中的樣品在6個迷你捕集柱中捕集（反相柱中的聚合物的保留力等同于C4）并伴隨后續(xù)的反相分離進(jìn)行脫鹽。此方法確保了穩(wěn)定高精準(zhǔn)分析。

分析實(shí)例

此分析結(jié)果為6種蛋白質(zhì)（1 pmol）混合物消化的分析結(jié)果，如下圖3所示。 為了對比區(qū)分，最上面的色譜圖為1D LC-MS的分析結(jié)果，端交疊的色譜是二維分析中反相LC-MS的分析結(jié)果。在一維分析中對每一種蛋白質(zhì)的分析。從中可見，運(yùn)用此系統(tǒng)可大大改進(jìn)肽的分離度水平。

初級洗脫使用的鹽是硫酸銨。每一個消化物的濃度分別為1mM, 10 mM, 20 mM, 30 mM, 50 mM和 99 mM。

根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究所，美國心理健康研究所與島津達(dá)成的CRADA協(xié)議，島津公司一直致力于參與蛋白質(zhì)組分析的多維HPLC系統(tǒng)的聯(lián)合研發(fā)過程。

CRADA:
合作研發(fā)協(xié)議（是一個的聯(lián)合研究項目，通常由美國衛(wèi)生與人力服務(wù)部下屬的科研機(jī)構(gòu)，一個公司和其他的科研機(jī)構(gòu)共同完成）

NIMH:
美國心理健康研究所