1、原理及適用范圍

大腸菌群是評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，目前已被廣泛應(yīng)用于食品衛(wèi)生檢驗(yàn)工作中。大腸菌群多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類經(jīng)?；顒?dòng)的場(chǎng)所以及有糞便污染的地方，大腸菌群數(shù)的高低，表明了食品及食品生產(chǎn)過(guò)程中受污染的程度。大腸菌群測(cè)試片（FilmplateTM Enumeration of Coliform BE211）含有選擇性培養(yǎng)基、大腸菌群特異性半乳糖苷酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠，運(yùn)用微生物測(cè)試片專有技術(shù)，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品。本產(chǎn)品適合于食品、飲用水及原料中大腸菌群的計(jì)數(shù)，也可用于食品加工設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測(cè)。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)（GB 4789.3）。

2、操作方法

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液。

2.2、接種：一般食品選2～3個(gè)適宜的稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將大腸菌群測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)稀釋度接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。

2.3、培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式

3.1、培養(yǎng)后紙片上的藍(lán)色菌落為大腸菌群菌落，選擇菌落數(shù)在15CFU～150CFU之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)。

3.2、若兩個(gè)稀釋度的菌落數(shù)均在15CFU～150CFU之間，則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之，即為每毫升（或每克）樣品中的大腸菌群菌落數(shù)。

3.3、如果所有稀釋度的測(cè)試片上的菌落數(shù)都小于15CFU，則計(jì)數(shù)稀釋度的測(cè)試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

3.4、如果所有稀釋度的測(cè)試片上均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

3.5、如果稀釋度的測(cè)試片上的菌落數(shù)大于150CFU個(gè)時(shí)，計(jì)數(shù)稀釋度的測(cè)試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。計(jì)數(shù)菌落數(shù)大于150CFU的測(cè)試片時(shí)，也可計(jì)數(shù)一個(gè)或兩個(gè)具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù)，換算成單個(gè)方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以20(紙片生長(zhǎng)面積為20cm2)即為測(cè)試片上估算的菌落數(shù)。報(bào)告單位以CFU/mL（或CFU/g）表示。

4、附加說(shuō)明

4.1、大腸菌群測(cè)試片不但可以大大縮短檢測(cè)時(shí)間，而且檢測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)方法很接近，符合率可達(dá)90％左右。

4.2、樣品勻液的pH值應(yīng)在 6.5～7.5之間，必要時(shí)用1mol/L氫氧化鈉（NaOH）或1mol/L鹽酸（HCl）調(diào)pH。

5、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。