倍性育種，指通過(guò)改變?nèi)旧w的數(shù)量，產(chǎn)生不同的變異個(gè)體，進(jìn)而選擇性狀優(yōu)良變異個(gè)體培育新品種。正常的配子細(xì)胞中所包含的染色體數(shù)或半數(shù)的體細(xì)胞染色體數(shù)稱為一套單倍染色體，用符號(hào)N表示。具有一個(gè)染色體組的細(xì)胞和由這樣的細(xì)胞組成的個(gè)體稱為單倍體(N) ，具有兩個(gè)染色體組的細(xì)胞或個(gè)體稱為二倍體（2N），具有兩個(gè)以上整套染色體組的細(xì)胞或個(gè)體則稱為多倍體，包括三倍體（3N）、四倍體（4N）等。

   傳統(tǒng)的倍性鑒定主要采用常規(guī)壓片法鏡檢統(tǒng)計(jì)染色體數(shù)目，但采用這種方法很難尋找到分裂中期染色體分散良好并可進(jìn)行計(jì)數(shù)的細(xì)胞，尤其是對(duì)于染色體條數(shù)眾多的物種，而且整個(gè)過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng)，檢測(cè)效率低。采用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）進(jìn)行倍性分析大大提高了倍性分析的效率，幾分鐘就可以快速準(zhǔn)確檢測(cè)同一物種范圍內(nèi)不同倍性的樣品。FCM作為一項(xiàng)快速、高效的檢測(cè)技術(shù)，被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞分類學(xué)、植物遺傳學(xué)及植物生理學(xué)等研究領(lǐng)域中。

實(shí)驗(yàn)原理

  首先通過(guò)物理方法使動(dòng)植物組織（植物一般是葉片，動(dòng)物一般是血液或者肌肉組織）中的細(xì)胞游離出來(lái)，再加入裂解液將細(xì)胞中的細(xì)胞核釋放出來(lái)，并打開(kāi)DNA鏈，然后用DAPI染液將細(xì)胞核DNA上的A-T堿基對(duì)特異性染色，再用儀器檢測(cè)被染色的A-T堿基對(duì)發(fā)出的熒光強(qiáng)度，這個(gè)熒光強(qiáng)度對(duì)應(yīng)的就是一個(gè)細(xì)胞中DNA的含量。比如二倍體的熒光強(qiáng)度是50（橫坐標(biāo)），那么四倍體的熒光強(qiáng)度就是100（橫坐標(biāo)）?？v坐標(biāo)是細(xì)胞數(shù)量的顯示。

實(shí)驗(yàn)方法與檢測(cè)設(shè)備

  我們采用配置紫外激光光源的Sysmex-Partec CyFlow倍性分析儀，搭配Sysmex CyStain DAPI倍性分析試劑盒（兩步法）和CellTrics濾網(wǎng)，在2min內(nèi)即可完成一個(gè)樣本的檢測(cè)，為您提供高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，并出具專業(yè)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)步驟如下：

1）在裂解液中物理破碎動(dòng)植物組織，動(dòng)物組織一般是用剪刀剪碎，植物一般是葉片用鋒利的雙面刀片切碎。不同的組織樣本處理的方法各不相同；

2）將帶有裂解液的破碎的組織樣本過(guò)細(xì)胞濾網(wǎng)（常用的為sysmex公司的30umCellTrics濾網(wǎng)）過(guò)濾以去除未切碎的組織塊；

3）加入4倍裂解液體積的染液，用手指輕彈混勻后上機(jī)檢測(cè)；

4）收集結(jié)果。

成功檢測(cè)案例

  目前我們應(yīng)用這種方法成功檢測(cè)倍性的植物有：草莓，蘭花，番茄，水稻，擬南芥，小麥，玉米，牡丹，芍藥，獼猴桃，馬鈴薯，谷子，紫薇，百合，月季，柑橘，枇杷等；動(dòng)物有各種魚類，海參幼蟲，貝類等。