特點
修改后的 CTAB 操作流程可確保更快地處理食品樣本
對即使是加工食品中的碎片化 DNA 進行高效純化
不會從復(fù)雜的食品基質(zhì)中攜帶 PCR 抑制物
適合高度加工食品的方案
產(chǎn)品詳情
DNeasy mericon Food Kit 設(shè)計用于從各種生食品和加工食品中提取高品質(zhì)的核酸。可盡量減少從復(fù)雜的食品基質(zhì)中攜帶 PCR 抑制物的情況。該試劑盒是綜合性 QIAGEN 食品檢測產(chǎn)品組合的一部分,后者還具有針對病原體和 GMO DNA 檢測以及成分認證的檢測。操作流程可在 QIAcube Connect 上全自動完成。
績效
在生產(chǎn)過程中,食品會受到高溫、輻照、高壓和 pH 值變化的影響,從而導(dǎo)致 DNA 降解和斷裂。DNeasy mericon Food Kit 的化學性質(zhì)經(jīng)過優(yōu)化,可回收短 DNA 片段(最小 100 bp),確保即使是高度片段化的 DNA 也能得到高效提取,并隨后在 PCR 反應(yīng)中進行擴增。憑借這些特點,使用 DNeasy mericon Food Kit 進行提取成為第一種普遍適用的提取方法,即使在使用強抑制性、高度加工、多脂肪、酸性、高或低 DNA 含量的食品時,也能獲得非常不錯且可靠的結(jié)果(見圖“DNA 產(chǎn)量高,攜帶抑制物極少”和圖“對抑制物的耐受性提高”)。此外,不再需要針對不同的食品基質(zhì)制定多種裂解操作流程。
原理
DNeasy mericon Food Kit 采用改良的十六烷基三甲基溴hua銨 (CTAB) 提取細胞總核酸。
非離子洗滌劑 CTAB 廣泛用于從多種組織類型中高效提取細胞總核酸。根據(jù)鹽分條件的不同,CTAB 可與細胞核酸(低鹽條件)或多糖、蛋白質(zhì)和植物代謝物等細胞抑制物(高鹽條件;如 Food Lysis Buffer 中的情況)復(fù)合。
與傳統(tǒng) CTAB 方案相比,其工作流程步驟更少,2.5 小時內(nèi)可處理多達 30 個樣本(見圖“高效快速的 DNA 提取”)。使用這些試劑盒進行 DNA 回收的回收率和效率明顯更高。
程序
DNeasy mericon Food Kit 的優(yōu)化方案將 CTAB 與 Proteinase K 結(jié)合使用,首先消化致密組織,然后沉淀蛋白質(zhì),同時沉淀其他細胞和食源性抑制物。
離心沉淀抑制物,提取的 DNA 仍留在溶液中。在隨后的氯仿萃取過程中,未沉淀的任何殘留 CTAB 蛋白、CTAB 碎片或 CTAB 多糖復(fù)合物與其他親脂性抑制物一起通過萃取到有機氯仿相中而被去除。只有含有 DNA 和已明顯耗盡抑制物的水相才會得到進一步處理。將該水相與結(jié)合緩沖液(用于調(diào)整結(jié)合條件)混合后應(yīng)用于 QIAquick Spin Columns。得到的 DNA 可立即用于下游 mericon real-time PCR 檢測。
應(yīng)用
DNeasy mericon Food Kit 設(shè)計用于從各種生食品和加工食品基質(zhì)中快速(2.5 小時內(nèi)多達 30 次提取)純化 DNA,同時盡量減少復(fù)雜食品樣本所固有的 PCR 抑制物攜帶。