本產(chǎn)品是基于ELISA夾心法用于外泌體定性定量的檢測試劑盒，利用高性能CD9捕獲抗體和CD81檢測抗體可以靈敏地檢測共表達(dá)外泌體表面標(biāo)記的CD9和CD81靶標(biāo)。本產(chǎn)品可適用于人體體液、細(xì)胞培養(yǎng)液等多種樣本，能夠?qū)崿F(xiàn)對原始樣本中的外泌體進(jìn)行快速精準(zhǔn)定量。
產(chǎn)品組分及儲存條件
名稱 | 規(guī)格 | 儲存條件 |
捕獲抗體包被板 | 96 T | 2-8 ℃ |
Exosomes標(biāo)準(zhǔn)品 | 1 mL*5瓶 | -20 ℃ |
酶標(biāo)記物 | 10 mL | 2-8 ℃ |
顯色液A | 6 mL | 2-8 ℃ |
顯色液B | 6 mL | 2-8 ℃ |
終止液 | 6 mL | 2-8 ℃ |
濃縮洗液（20X） | 30 mL/瓶 | 2-8 ℃ |
稀釋液 | 5mL | 2-8 ℃ |
有效期：產(chǎn)品有效期為1年
檢驗流程
1、檢測前準(zhǔn)備工作
①所有試劑應(yīng)在使用前室溫平衡至少15min。
②取濃縮洗液（20X），用蒸餾水或去離子水將20X濃縮洗液稀釋成1X工作液，混勻備用。
（試劑盒提供稀釋液，可自行用高濃度標(biāo)準(zhǔn)品稀釋使用）
2、操作步驟
①準(zhǔn)備已平衡好的板條和試劑，試劑充分搖勻。
②微孔板中分別加入各濃度Exosomes標(biāo)準(zhǔn)品以及待測樣本（100μL/孔）。
③用封板膜封住反應(yīng)孔，于37℃恒溫條件下，避光孵育60min。
④孵育結(jié)束后，加入工作液洗液清洗3次，每次200-250μL/孔，洗板結(jié)束后在吸水紙上拍干。
⑤每孔加入100μL酶標(biāo)記物，用封板膜封住反應(yīng)孔，于37℃恒溫條件下，避光孵育60 min。
⑥孵育結(jié)束后，加入工作液洗液清洗3次，每次200-250μL/孔，洗板結(jié)束后在吸水紙上拍干。
⑦配置顯色底物工作液：將顯色液A和B等比例混合得顯色底物工作液（請配置完2 min 內(nèi)使用）。
⑧各反應(yīng)孔加入100μL顯色底物液工作液，37℃恒溫條件下避光反應(yīng)30分鐘。
⑨各反應(yīng)孔加入50μL終止液，混勻后即刻測量OD450值（3min 內(nèi)），并繪制XY線性曲線。
3、校準(zhǔn)程序
采用XY線性擬合，確保線性相關(guān)系數(shù)R2≥0.99，每次進(jìn)行實驗時，必須進(jìn)行完整的校準(zhǔn)品操作，以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
校準(zhǔn)點 | S1 | S2 | S3 | S4 | S5 |
濃度：ng/ml | 0 | 7.816 | 15.625 | 31.25 | 45 |
OD450 | 0.0737 | 0.3074 | 0.5183 | 0.8618 | 1.2945 |
注意：本圖僅供參考，應(yīng)以同次試驗標(biāo)準(zhǔn)品所繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中的Exosome的含量。
注意事項
1. 本試劑盒需避光保存。
2. 本品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。
