產(chǎn)品簡(jiǎn)介

麥胚凝集素（WGA）是一種研究較為深入的凝集素，以其對(duì)N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸的高親和力結(jié)合特性而聞名，這使其成為多種生物學(xué)應(yīng)用中的重要工具。WGA與糖綴合物的相互作用，使得WGA衍生物及偶聯(lián)物在熒光成像和分析領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，可用于標(biāo)記酵母芽痕、纖維化瘢痕組織以及革蘭氏細(xì)菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞膜。WGA特異性靶向由β-1,4-葡萄糖胺殘基連接形成的序列，即殼多糖寡糖。其每個(gè)單體含有兩個(gè)相同的、互不干擾的結(jié)合位點(diǎn)，可互補(bǔ)結(jié)合3或4個(gè)β-1,4-葡萄糖胺單元。在已測(cè)試的單糖中，僅葡萄糖胺（GlcNAc）表現(xiàn)出與WGA的強(qiáng)結(jié)合，甘露糖胺（ManNAc）無(wú)結(jié)合活性，而半乳糖胺（GalNAc）則呈現(xiàn)弱結(jié)合。iFluor® 700標(biāo)記的WGA偶聯(lián)物具有該染料teyou的明亮遠(yuǎn)紅光熒光特性（激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)=690/713 nm）。值得注意的是，該偶聯(lián)物仍保持對(duì)唾液酸和N-乙酰葡萄糖胺殘基的結(jié)合能力，從而增強(qiáng)了其在各類科學(xué)研究熒光成像與分析中的應(yīng)用價(jià)值。

產(chǎn)品性質(zhì)

Ex (nm)：690

Em (nm)：713

溶劑：Water

適用儀器

熒光顯微鏡  

Ex:                   Cy5 濾波片組

Em：                    Cy5 濾波片組

推薦孔板:                    黑色透明底板

儲(chǔ)備溶液配制

iFluor 700 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物儲(chǔ)備液 (200X)：將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲(chǔ)備溶液。

注意：重新配制的綴合物溶液可在 2-8 °C 下短期儲(chǔ)存，或在 -20 °C 下長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

工作溶液配制

iFluor 700小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物工作溶液 (1X)：將 5 μL 200X WGA 儲(chǔ)備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。

注意：不同細(xì)胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。 活細(xì)胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL。

操作方案

活細(xì)胞染色

1. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

2. 添加 100 µL iFluor 700-WGA 工作溶液。

3. 將細(xì)胞與 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

5. 使用 Cy5 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。

固定細(xì)胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定細(xì)胞。

注意：對(duì)于固定細(xì)胞膜染色，建議在沒(méi)有透化步驟的情況下進(jìn)行染色。固定后透化步驟會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。

2. 添加 100 µL iFluor 700-WGA 工作溶液。

3. 在室溫下，用 WGA 工作溶液孵育細(xì)胞 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

5. 使用 Cy5 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事項(xiàng) ：

1、該產(chǎn)品不適用于革蘭氏陰性細(xì)菌。

2、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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