轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控,含EGFP基因的CHO細(xì)胞,CHO-AA13細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開(kāi)始轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控,含EGFP基因的CHO細(xì)胞,CHO-AA13細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
TC-hxbz-316 人宮頸癌細(xì)胞(HPV-18 永生化細(xì)胞) HeLa229
TC-hxbz-317 人宮頸癌細(xì)胞 Hela P10s-11F
TC-hxbz-318 人宮頸癌細(xì)胞 HeLa-S3
TC-hxbz-319 人宮頸癌細(xì)胞 SiHa
TC-hxbz-320 宮頸癌細(xì)胞 HCE1
TC-hxbz-321 人宮頸癌細(xì)胞 CaSKi
TC-hxbz-322 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 RL95-2
TC-hxbz-323 人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) HCC 94
TC-hxbz-324 人子宮頸癌細(xì)胞 C-33A
TC-hxbz-325 人前列腺癌細(xì)胞 PC-3
TC-hxbz-326 人前列腺癌細(xì)胞 PC-3M
TC-hxbz-327 人前列腺癌細(xì)胞高轉(zhuǎn)移亞系 PC-3M 1E8
TC-hxbz-328 人前列腺癌細(xì)胞高轉(zhuǎn)移亞系 PC-3M 2B4
TC-hxbz-329 人前列腺癌細(xì)胞 DU-145
TC-hxbz-330 人前列腺癌細(xì)胞 UI-1
TC-hxbz-331 人前列腺癌細(xì)胞 22RV1
TC-hxbz-332 前列腺癌細(xì)胞 LncaP
TC-hxbz-333 非雄激素依賴型前列腺癌 Tsu-Prl
TC-hxbz-334 人胎盤(pán)絨毛癌細(xì)胞 JAR
TC-hxbz-335 人絨癌細(xì)胞 JEG-3
TC-hxbz-336 人絨毛膜癌 JEG
TC-hxbz-337 人胎盤(pán)絨膜癌細(xì)胞 BeWo