念珠菌顯色培養(yǎng)基根據(jù)酶底物法，通過(guò)顯色來(lái)區(qū)別不同念珠菌，25-28℃培養(yǎng)48小時(shí)后，白色念球菌顯藍(lán)綠色，熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色，光滑念珠菌顯紫色，克柔假絲酵母顯粉色，其它念珠菌顯白色，細(xì)菌被抑制。
念珠菌顯色培養(yǎng)基成份 (g/L)
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(蛋白胨等) | 30.0 |
色素 | 2.9 |
* | 0.1 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 6.0 ± 0.2 25 ℃ | |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。
注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
用法
稱取本品9.6g（可按4.8g/100ml的比例擴(kuò)大或縮小），加入200ml蒸餾水或純化水中，加熱溶解并不停攪拌，煮沸不要超過(guò)1分鐘。將加熱后的培養(yǎng)基水浴冷卻至45-50℃，輕輕地?fù)u勻，傾入無(wú)菌平皿（9cm的15ml/皿，7cm的10ml/皿），瓊脂*凝固后，在36℃±1℃的培養(yǎng)箱中倒置放置0.5-1小時(shí)，備用。
注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)。
貯存
制備好的平板應(yīng)立即使用，應(yīng)避免光線直接照射。干粉培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度2-8℃，注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
2、取樣品液涂布或劃線接種于平板上；
3、25-28℃培養(yǎng)48h。白色念珠菌典型特征為藍(lán)綠色，熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色，光滑念珠菌顯紫色，克柔假絲酵母顯粉色，其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
4 、對(duì)可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上，25-28℃培養(yǎng)24-48小時(shí)，挑取單菌落做鏡檢和生化試驗(yàn)。
質(zhì)量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈乳白色。制備好的平板呈透明無(wú)色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗(yàn)
在25-30℃培養(yǎng)48小時(shí)：
質(zhì)控菌株 | 生長(zhǎng)情況 | 菌落顏色 |
白色念珠菌 | +++ | 藍(lán)綠色 |
熱帶念珠菌 | +++ | 藍(lán)灰色、鐵藍(lán)色 |
克柔氏假絲酵母菌 | +++ | 粉紅色 |
光滑念珠菌 | +++ | 紫色 |
其它念珠菌 | +++ | 白色 |
大腸桿菌 | - | - |
方法的局限性
本培養(yǎng)基鑒定白色念珠菌，少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性，需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
白色念珠菌典型特征為藍(lán)綠色，熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色，光滑念珠菌顯紫色，克柔假絲酵母顯粉色，其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
