上皮細(xì)胞包括腺上皮，是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分。又由于癌起源于上皮組織，故上皮細(xì)胞培養(yǎng)特別受到重視。但上皮細(xì)胞培養(yǎng)中?；祀s有成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)時(shí)生長速度往往超過上皮細(xì)胞，并難以純化，同時(shí)上皮細(xì)胞難以在體外長期生存，而且體外培養(yǎng)周期較長。因此細(xì)胞純化、延長體外培養(yǎng)壽命和縮短體外培養(yǎng)周期是上皮細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵。
以皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞（keratinocyte，又名角朊細(xì)胞）為例，角朊細(xì)胞是構(gòu)成皮膚表皮的主要細(xì)胞，其正常的增殖、分化維系著表皮正常的結(jié)構(gòu)和生理功能。角阮細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)是建立角骯細(xì)胞庫*的步驟，也是復(fù)合人工皮膚組織工程學(xué)研究的先決條件。
成纖維細(xì)胞的旺盛生長能抑制角朊細(xì)胞的增殖，因此盡可能地從分離物中減少成纖維細(xì)胞的污染并控制它們?cè)谂囵B(yǎng)時(shí)過度生長是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。
目前較常用的角朊細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法可歸納為3種：
一、 組織塊法
zui早的角朊細(xì)胞培養(yǎng)方法是組織塊法,將手術(shù)切取的無菌皮膚修剪為1-3mm3大小組織塊,間距3-5mm排布在培養(yǎng)瓶底壁上,加入少量培養(yǎng)液,待組織塊貼附后（約2-3小時(shí)）,加入培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)。角朊細(xì)胞由組織塊中游出,圍繞組織塊周圍生長,呈同心圓狀。這種方法的確可以使角朊細(xì)胞在體外培養(yǎng)下存活增殖,但缺點(diǎn)是無法避免成纖維細(xì)胞的污染。
二、 細(xì)胞滋養(yǎng)層和血清培養(yǎng)法
以Rheinwald和Green在1975年創(chuàng)立的利用經(jīng)6GryY射線照射失去增殖能力的鼠3T3細(xì)胞作為滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)角朊細(xì)胞的方法為代表,其特征是3T3細(xì)胞滋養(yǎng)層和使用含F(xiàn)CS的培養(yǎng)液。這種培養(yǎng)方法，一般可使角朊細(xì)胞分裂50次左右,缺點(diǎn)是細(xì)胞培養(yǎng)體系需血清、涂層板和細(xì)胞滋養(yǎng)層（feeder cells），成本較高，操作繁瑣。
三、 20世紀(jì)80-90年代，無滋養(yǎng)層無血清培養(yǎng)法
傳統(tǒng)的方法需要在培養(yǎng)液中加入一定量的血清。含血清的培養(yǎng)液的生物學(xué)效應(yīng)早已被證實(shí),其含有多種生長因子和活性物質(zhì)有利于細(xì)胞生長,但血清成分復(fù)雜,無法準(zhǔn)確深入地研究某種單一物質(zhì)對(duì)細(xì)胞的作用及機(jī)制,因此也有學(xué)者不斷探索添加各種已知成分的細(xì)胞生長所需輔劑而不含血清的細(xì)胞體外培養(yǎng)條件。目前較為常見的一種無血清培養(yǎng)體系為MCDB153（內(nèi)含多種微量元素）作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加EGF、INS、Hydroeortisone、BpE、Transfferin、氨基乙醇、磷酸氨基乙醇、氯化鈣等輔劑,這個(gè)體系可以保持角阮細(xì)胞的快速增殖,并抑制成纖維細(xì)胞的生長,使角骯細(xì)胞在無血清條件下的體外培養(yǎng)獲得成功。
2002年，CELLnTEC公司著眼于上皮細(xì)胞研究視角，專業(yè)研發(fā)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基及相關(guān)產(chǎn)品、人原代細(xì)胞和Long-term動(dòng)物細(xì)胞。推出一代（newest generation）適用于體外上皮細(xì)胞培養(yǎng)的2D、3D培養(yǎng)基。*的祖細(xì)胞（Progenitor Cell）配方，模仿祖細(xì)胞體內(nèi)微環(huán)境，特定維持祖細(xì)胞處于增殖狀態(tài)，延緩祖細(xì)胞分化。系祖細(xì)胞（Progenitor Cell Targeted）培養(yǎng)基，即PCT培養(yǎng)基。
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