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DMEM培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液的基礎(chǔ)上
2013-12-23 閱讀(1170)
絕大多數(shù)DMEM培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液基礎(chǔ)上
zui廣泛運(yùn)用的培育基是Eearle`s MEM 的混合物，其間富含13種有必要氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包含非有必要氨基酸，維生素的規(guī)模亦很廣，別的慣例富含無機(jī)鹽和代謝添加劑。MEM/F12 這兩種培育基各取1/2，構(gòu)成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培育基。
Dulbecco`s改進(jìn)培育基——DMEM，現(xiàn)運(yùn)用于疾速成長的細(xì)胞，同MEM富含一樣的營養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。挑選某種培育基，應(yīng)細(xì)心曉得成分表，應(yīng)曉得大多數(shù)景象下培育基都有缺少。例如，有些培育基在氨基酸中包富含谷氨酸，而這種培育基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)范疇，但它對某些對谷氨酸靈敏的可能有細(xì)胞外毒性損害的神經(jīng)元而言，則并非*挑選，特別是若是神經(jīng)元成長在缺少膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。
DMEM培養(yǎng)基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的濃度
這是由于它具有不穩(wěn)定性以及在許多細(xì)胞培育中它常用作碳源。關(guān)于神經(jīng)元的培育常常在根底培育基中添加葡萄糖的含量到0.6%或許參加丙酮酸(若培育基中這兩種物質(zhì)缺少時(shí))。MEM與F12均要用5%的CO2來平衡，DMEM含更高濃度的NaCO3，要用10%的CO2來平衡，當(dāng)然也能夠在較低CO2濃度下運(yùn)用。
這些DMEM培育基的組成成分是樹立在對不一樣細(xì)胞系成長的研討之上的，但通常在原代培育中運(yùn)用也能有對比令人滿意的成果。原則上，HEPES作為緩沖劑可用來替代碳酸氫鹽，以免除需求高濃度CO2培育環(huán)境的約束。實(shí)際操作中并非如此簡略。
