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上海哈靈生物科技有限公司
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物III活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
2016-6-21 閱讀(488)
主要用途
我公司線粒體呼吸鏈復(fù)合物III（輔酶Q-細(xì)胞色素C還原酶）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用還原性合成輔酶Q同功類似物和特異性抑制劑，通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中細(xì)胞色素C還原后峰值的增高，即采用比色法測定樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的輔酶Q-細(xì)胞色素C還原酶的特異性活性檢測?？捎糜?strong>衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理身理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。
注意事項(xiàng)
- 本產(chǎn)品為21次操作（10個(gè)樣本），包括1次背景對照測定
- 操作時(shí)，須戴手套
- 系統(tǒng)操作過程中，背景測定只需1次
- 線粒體樣品檢測前，須溶解；建議凍存融解（－70℃至37℃）循環(huán)3次
- 如果增強(qiáng)酶活檢測，建議使用線粒體復(fù)合物待測樣品預(yù)處理試劑盒－10342
- 每增加1個(gè)樣品，增加反應(yīng)工作液為：反應(yīng)液（Reagent B）5微升＋穩(wěn)定工作液5微升，以此類推。配制反應(yīng)工作液時(shí)，須根據(jù)樣本數(shù)量配制實(shí)際工作液容量
- 用戶可以根據(jù)實(shí)際樣品，計(jì)算緩沖液（Reagent A）、反應(yīng)工作液和底物液（Reagent D）三者之和，混勻后，室溫下靜置10分鐘，置于冰槽里等待檢測
- 加入樣品啟動(dòng)反應(yīng)后3秒內(nèi)即刻比色測定
- 分光光度計(jì)波長嚴(yán)格設(shè)置在550nm，誤差10nm將不產(chǎn)生信號
- 測定可以持續(xù)2分鐘
- 測定值由低到高變化，即2分鐘測定讀數(shù)高于0分鐘測定讀數(shù)，表明有酶活性
- 比色測定后，比色皿須清洗*
- 建議用戶使用分光光度儀檢測，總體系減半可以增加檢測樣本數(shù)
- 建議待測樣本線粒體蛋白濃度為10微克/100微升；如果樣本酶活性過低或過高，則可以增加或降低樣本量；注意計(jì)算公式的調(diào)整（本公司提供線粒體溶解試劑盒HL10018為后續(xù)的線粒體蛋白濃度測定的預(yù)處理試劑盒和 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒HL30030.1）
- 如果使用細(xì)胞或組織裂解懸液，則蛋白濃度為50微克/100微升
- 樣品特異活性是指抗霉素敏感的輔酶Q－細(xì)胞色素C還原酶，去除其它干擾因素（例如復(fù)合物I/II/IV等）
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物III（輔酶Q－細(xì)胞色素C還原酶）單位活性定義為：在30℃，pH 7.5條件下，每分鐘內(nèi)能夠氧化1微摩爾還原型泛醌（CoQH2）所需的酶量作為一個(gè)活性單位
- 本公司提供系列線粒體及其酶類技術(shù)產(chǎn)品
- 如：
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶）活性定量檢測試劑盒
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶）活性定量檢測試劑盒
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV（正鐵細(xì)胞色素C－氧化還原酶）活性定量檢測試劑盒
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性定量檢測試劑盒
