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上海哈靈生物科技有限公司
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明膠法人體胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒產(chǎn)品說明書
2017-4-1 閱讀(695)
明膠法人體胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒產(chǎn)品說明書
主要用途
明膠法人體胚胎干細(xì)胞繁殖試劑是一種旨在通過特殊明膠替代滋養(yǎng)細(xì)胞作為培養(yǎng)表面的包被處理，提供細(xì)胞的附著生長，促進(jìn)細(xì)胞繁殖，同時體外維護(hù)人體胚胎干細(xì)胞的多能性，抑制培養(yǎng)中的胚胎干細(xì)胞的自發(fā)分化的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新的人體胚胎干細(xì)胞系的建立、培養(yǎng)已有的胚胎干細(xì)胞系以及無基質(zhì)細(xì)胞的 CD34 干細(xì)胞等。產(chǎn)品即到即用，嚴(yán)格無菌、無病毒和支原體，性能穩(wěn)定，促細(xì)胞生長效應(yīng)，重復(fù)性高，建立標(biāo)準(zhǔn)化體系。
技術(shù)背景
胚胎干細(xì)胞生長在基質(zhì)表面，穩(wěn)定繁殖效應(yīng)明顯。同時，在富含各種營養(yǎng)元素的培養(yǎng)基中，包括精制胎牛血清，白血病抑制因子，非必需氨基酸、巰基乙醇以及預(yù)防污染的青霉素和鏈霉素等，維持胚胎干細(xì)胞活性。產(chǎn)品符合美國USDA、FDA和USP的規(guī)定。
產(chǎn)品內(nèi)容
包被液（Reagent A） 毫升
營養(yǎng)液（Reagent B） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保證6月
用戶自備
25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶：用于干細(xì)胞培養(yǎng)的容器
微波爐：用于試劑加熱融化的設(shè)備
細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于細(xì)胞孵育培養(yǎng)的設(shè)備
實(shí)驗(yàn)提示
1． 準(zhǔn)備1個25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶
2． 取出包被液（Reagent A），擰松瓶蓋（不要打開）
3． 放進(jìn)微波爐加熱（注意：避免溢出）
4． 移取 毫升包被液（Reagent A）到25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶，均勻鋪平
5． 室溫下，靜置30分鐘
6． 使用無菌吸管，真空抽吸培養(yǎng)瓶里的包被液（Reagent A）
7． 加入1毫升（5X 105細(xì)胞）用戶自備的人體胚胎干細(xì)胞
8． 加入 毫升營養(yǎng)液（Reagent B），混勻鋪平 1
9． 放進(jìn)37℃二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24小時
10．小心抽去細(xì)胞培養(yǎng)液
11．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟8至10一次
12．傳代前4小時使用2毫升營養(yǎng)液（Reagent B）換液一次，傳代比例為1：1至1：10之間
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為10次操作
2． 嚴(yán)格無菌操作
3． 操作時須戴手套
4． 使用時，避免污染母液
5． 用戶根據(jù)需求，可以添加各種生長因子，例如成纖維細(xì)胞生長因子（Fibroblast growth factor；FGF）等
6． 建議每天換液；如果溶液顏色為桔紅色，務(wù)必即刻換液，不要等到溶液顏色為黃色
7． 建議按下表用量使用
8． 本公司提供系列細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無噬菌體、支原體、病毒污染
