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上海哈靈生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： ELISA代測服務(wù),ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒,ELISA試劑盒說明書,大鼠ELISA試劑盒 |
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哈靈生物提供 Real time PCR 技術(shù)服務(wù)
2013-7-22 閱讀(772)
一、樣品制備方法:
1.懸浮細胞：
懸浮細胞培養(yǎng)液倒入離心管中，離心沉積細胞，棄去上清液。參入1ml PBS懸浮細胞，轉(zhuǎn)入小離心管中，低速離心沉淀細胞，棄去PBS，將細胞沉積（1×107個細胞）放入-70℃ 冰箱保管。干冰運送。也能夠在細胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復(fù)吸打幾回，目視可見細胞層溶解*后，-70℃保管作用更佳。
2.貼壁細胞：
取大約1×107個貼壁細胞，胰酶消化后參入PBS懸浮細胞，低速離心搜集，棄去液體，參加 1 ml PBS懸浮細胞，轉(zhuǎn)入1.5ml離心管中，低速離心沉積細胞，棄去PBS，放入-70℃冰箱保管。干冰運送。也能夠在細胞沉積中參加1ml的 Trizol 裂解液重復(fù)吸打幾回，目視可見細胞層溶解*后，-70℃保管作用更佳。
3.組織：
收集新鮮組織（注意：生物體逝世后1分鐘內(nèi)取資料并保管好），組織塊以PBS或生理鹽水清潔干凈，切為小塊，放入液氮或-70℃冰箱中保管，干冰運送。也可每 50-100 mg 組織加1 ml Trizol溶液勻漿裂解組織樣品。勻漿的裂解液4℃ 短期保管（1個月）。-20℃或-70℃長時間保管。
二、樣品的要求：
1. 盡可能新鮮的樣品。
2. 質(zhì)量大約150毫克的組織樣本。
3. 細胞數(shù)大于1×107的細胞樣本
三、注意事項：
1.因RNA比較容易出現(xiàn)降解，建議將標本加入Trizol后運輸。
2.實驗所需要準備的取材工具以及組織存放器皿等必須得經(jīng)過滅菌除酶處理。
3.取材的實驗環(huán)境要求沒有RNA酶污染。
4.客戶必須自備引物。也可以委托本公司設(shè)計合成。
