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人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

時間:2016-11-14閱讀:196
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人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒用于測定人血清、齦溝液及相關(guān)液體樣本中白介素17(IL-4)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本 試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白介素4(IL-4)水平。用純化的人白介素4(IL-4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加 入白介素4(IL-4),再與HRP標(biāo)記的白介素4(IL-4)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素4(IL-4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光 度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白介素4(IL-4)濃度。 

試劑盒組成 

1 20倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 3ml×1瓶

2 酶標(biāo)試劑 3ml×1瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品(40ng/L) 0.5ml×1瓶

3 酶標(biāo)包被板 12孔×3條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶

4 樣品稀釋液 3ml×1瓶 10 說明書 1份

5 顯色劑A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2張 

6 顯色劑B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1個

注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

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