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北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司

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更新時(shí)間:2022-08-03 13:42:16瀏覽次數(shù):590次

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性能
QIAGEN-tip 100陰離子交換柱利用重力流技術(shù)純化質(zhì)粒DNA。只需25–100 ml培養(yǎng)基,即可純化得到多達(dá)100 µg質(zhì)粒DNA。QIAGEN-tips*的分離特性,使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度(參見Pure plasmid DNA)。純化得到的DNA適合轉(zhuǎn)染等多種敏感應(yīng)用(參見Transfection efficiency)。
原理

QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計(jì)。預(yù)裝的QIAGEN-tips(參見Anion-exchange tips)利用重力流原理工作,縮短了純化質(zhì)粒的手動(dòng)操作時(shí)間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免使用*、氯仿、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì),減小對(duì)使用者和環(huán)境的危害。

操作流程

配合QIAGEN Plasmid Buffer Set,細(xì)菌裂解產(chǎn)物通過離心澄清(參見QIAGEN Plasmid Kit procedures)。澄清后的裂解產(chǎn)物上樣到QIAGEN-tip 100,質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進(jìn)行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除,用高鹽緩沖液洗脫質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后,離心收集。

應(yīng)用

QIAGEN-tip 100純化得到的質(zhì)粒DNA適用于轉(zhuǎn)染、克隆、測序和體外轉(zhuǎn)錄等應(yīng)用。

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