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小鼠白介素4 IL-4ELISA試劑盒 北京低*

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更新時間:2016-05-26 14:07:07瀏覽次數(shù):381次

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小鼠白介素4 IL-4ELISA試劑盒

 

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主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,生物試劑,免疫組學,生物抗體,蛋白組學,分子生物等。

預期應(yīng)用:ELISA法檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中含量或靈敏度。
 1. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。 

2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。 

3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。 

4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8保存。標準品、*標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、*標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。 

5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。 

洗板方法 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。 
自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 
計算以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 
當混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。 
請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。 如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。底物請避光保存。 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
本品用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗HVA抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。1. 酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱)2. 微量加液器及吸頭,EP3. 蒸餾水或去離子水,全新濾紙
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。 如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

生化試劑應(yīng)用常見問題:

1 試劑空白

1 線性范圍變窄 現(xiàn)象:高值測不高。原因:生產(chǎn)試劑時有效成分投料量不足;試劑成份穩(wěn)定性較差。12 靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降,測定結(jié)果有嚴重系統(tǒng)誤差。原因:試劑底物濃度不足。13 低值偏高 現(xiàn)象:試劑空白的變化曲線吸光度VS時間明顯波動。原因:試劑自身不穩(wěn)定,自行分解;工具酶純度不夠,雜酶含量超限,導致干擾作用。

2 樣品信息

樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結(jié)果產(chǎn)生非化學反應(yīng)的干擾。因此,應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長或多波長的檢測模式,并在結(jié)果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。

3 測定范圍

每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍,樣品結(jié)果若超過此范圍,分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì),應(yīng)更換合格試劑。

4 底物耗盡

使用連續(xù)監(jiān)測法、兩點法測定酶活性時,若酶活性非常高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍,監(jiān)測期的吸光度將偏離線性,使測定結(jié)果不可靠。

5 酶的預活化

測定血清中的某些酶,如CK,離體采血后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基SH)被氧化造成的。只有通過適當?shù)倪€原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑,名為N一乙酰半*。實驗研究證明,NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。在AST,ALT采用IFCC*方法測定時需要磷酸吡哆醛預活化。需要強調(diào):含有活化劑的生化試劑,其測定酶活性的結(jié)果要高些。了解更多詳細信息

 

對外承攬試驗:免疫組化,熒光,Tunel,ElisaWB,

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