人凝膠原蛋白 gelsonELISA試劑盒

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主營產品： ELISA試劑盒，生物試劑，免疫組學，生物抗體，蛋白組學，分子生物等。

預期應用：ELISA法檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中含量或靈敏度。
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、*標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、*標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。
自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。
當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，*使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。底物請避光保存。不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
本品用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗HVA抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。1. 酶標儀（建議參考儀器使用說明提前預熱）2. 微量加液器及吸頭，EP管3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙
建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。

生化試劑應用常見問題:

1 試劑空白

1 線性范圍變窄現象：高值測不高。原因：生產試劑時有效成分投料量不足；試劑成份穩(wěn)定性較差。1．2 靈敏度變低現象：酶促反應速度曲線斜率下降，測定結果有嚴重系統(tǒng)誤差。原因：試劑底物濃度不足。1．3 低值偏高現象：試劑空白的變化曲線（吸光度VS時間）明顯波動。原因：試劑自身不穩(wěn)定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導致干擾作用。

2 樣品信息

樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結果產生非化學反應的干擾。因此，應根據溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，采用雙波長或多波長的檢測模式，并在結果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響，減少干擾程度。

3 測定范圍

每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，分析儀將顯示結果超過范圍的提示。表示試劑已經變質，應更換合格試劑。

4 底物耗盡

使用連續(xù)監(jiān)測法、兩點法測定酶活性時，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍，監(jiān)測期的吸光度將偏離線性，使測定結果不可靠。

5 酶的預活化

測定血清中的某些酶，如CK，離體（采血）后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基（一SH）被氧化造成的。只有通過適當的還原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑，名為N一乙酰半*。實驗研究證明，NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據。在AST，ALT采用IFCC*方法測定時需要磷酸吡哆醛預活化。需要強調：含有活化劑的生化試劑，其測定酶活性的結果要高些。了解更多詳細信息