人結(jié)蛋白 DesELISA試劑盒

免費代測ELISA試劑盒一周內(nèi)出結(jié)果

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北京雅安達生物技術(shù)有限公司立足于北京，面向全國。本產(chǎn)品應(yīng)用于“科研研究和臨床應(yīng)驗”

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主營產(chǎn)品： ELISA試劑盒，生物試劑，免疫組學，生物抗體，蛋白組學，分子生物等。

預(yù)期應(yīng)用：ELISA法檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中含量或靈敏度。
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、*標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、*標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算以標準物的濃度為橫坐標（對數(shù)坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
當混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。底物請避光保存。不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
本品用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗HVA抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。1. 酶標儀（建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱）2. 微量加液器及吸頭，EP管3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

生化試劑應(yīng)用常見問題:

1 試劑空白

1 線性范圍變窄現(xiàn)象：高值測不高。原因：生產(chǎn)試劑時有效成分投料量不足；試劑成份穩(wěn)定性較差。1．2 靈敏度變低現(xiàn)象：酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降，測定結(jié)果有嚴重系統(tǒng)誤差。原因：試劑底物濃度不足。1．3 低值偏高現(xiàn)象：試劑空白的變化曲線（吸光度VS時間）明顯波動。原因：試劑自身不穩(wěn)定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導致干擾作用。

2 樣品信息

樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結(jié)果產(chǎn)生非化學反應(yīng)的干擾。因此，應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，采用雙波長或多波長的檢測模式，并在結(jié)果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響，減少干擾程度。

3 測定范圍

每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過此范圍，分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。

4 底物耗盡

使用連續(xù)監(jiān)測法、兩點法測定酶活性時，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍，監(jiān)測期的吸光度將偏離線性，使測定結(jié)果不可靠。

5 酶的預(yù)活化

測定血清中的某些酶，如CK，離體（采血）后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基（一SH）被氧化造成的。只有通過適當?shù)倪€原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑，名為N一乙酰半*。實驗研究證明，NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。在AST，ALT采用IFCC*方法測定時需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強調(diào)：含有活化劑的生化試劑，其測定酶活性的結(jié)果要高些。了解更多詳細信息