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人(LAC IgG)說(shuō)明書,人狼瘡抗凝抗體IgGElisa試劑盒

時(shí)間:2014-4-10閱讀:304
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人(LAC IgG)說(shuō)明書,人狼瘡抗凝抗體IgGElisa試劑盒

實(shí)驗(yàn)原理:

   本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中人狼瘡抗凝抗體IgG(LAC IgG)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入狼瘡抗凝抗體IgG(LAC IgG),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的狼瘡抗凝抗體IgG(LAC IgG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人狼瘡抗凝抗體IgG(LAC IgG)濃度。

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  1. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  2. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。
  3. 配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。
  4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

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試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%11%

檢測(cè)范圍:                                             

10U/L -400U/L           

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8。

2.有效期:6個(gè)月

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