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技術(shù)文章

ELISA技術(shù)優(yōu)勢(shì)對(duì)比

閱讀：485發(fā)布時(shí)間：2014-1-9

 

隨著ELISPOT技術(shù)的不斷發(fā)展，它的優(yōu)勢(shì)也漸漸顯示出來(lái)，下面將列舉ELISPOT對(duì)比其它一些傳統(tǒng)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)所在。

ELISA 通過(guò)顯色反應(yīng)，在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較得出可溶性蛋白總量。ELISPOT 也是通過(guò)顯色反應(yīng)，在細(xì)胞分泌這種可溶性蛋白的相應(yīng)位置上顯現(xiàn)清晰可辨的斑點(diǎn)，可直接在顯微鏡下人工計(jì)數(shù)斑點(diǎn)或通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助的分析系統(tǒng)對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行計(jì)數(shù)， 1個(gè)斑點(diǎn)代表1個(gè)細(xì)胞，從而計(jì)算出分泌該蛋白的細(xì)胞的頻率。(某些研究不僅要測(cè)細(xì)胞因子生成量，還需檢測(cè)分泌此細(xì)胞因子的細(xì)胞頻率) 由于是單細(xì)胞水平檢測(cè)，ELISPOT比ELISA更靈敏，能從20萬(wàn)-30萬(wàn)細(xì)胞中檢出1個(gè)分泌該蛋白的細(xì)胞。捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素的單抗，在研究者以刺激劑激活細(xì)胞時(shí)，不會(huì)影響活化細(xì)胞分泌細(xì)胞因子。

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