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技術(shù)文章

干細(xì)胞無血清凍存液操作事項(xiàng)

閱讀：1300發(fā)布時(shí)間：2014-5-12

 

使用說明：

1. 細(xì)胞消化和計(jì)數(shù)，用*對(duì)待凍存的細(xì)胞進(jìn)行消化，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。

2. 1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。

3. 根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)的情況，加入適量的干細(xì)胞無血清凍存液，使細(xì)胞密度在1×106左右（或根據(jù)自己希望達(dá)到的細(xì)胞密度）。

4. 輕輕地重懸細(xì)胞（務(wù)必重懸均勻）。

5. 將重懸的細(xì)胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標(biāo)記或者貼上標(biāo)簽）中，旋緊凍存管蓋。

6. 將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。

7. 第二天將細(xì)胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。

注意事項(xiàng)：

●  用處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

● 控制好*的消化時(shí)間，切記消化過度，會(huì)影響復(fù)蘇效果。

● 重懸細(xì)胞的過程中，請(qǐng)務(wù)必要輕柔，以免損傷細(xì)胞，但同時(shí)也一定要充分重懸，這樣細(xì)胞在復(fù)蘇時(shí)才不會(huì)成團(tuán)。

● 細(xì)胞操作請(qǐng)注意無菌。


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