1、ELISA板 ：于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板，上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式，需要購買。常用聚苯乙烯和聚氯乙烯材料。注意：聚苯乙烯材料目前只有進(jìn)口，特點(diǎn)是孔大，加滿約300ul，此時(shí)實(shí)驗(yàn)中所加各試劑（包被液、一抗、二抗、顯色液、終止液等）均為100ul體積。而聚氯乙烯多為國產(chǎn)，孔較小，加滿約200ul，此時(shí)各試劑只需加50ul體積即可
2、各試劑配制
1）包被液（PH6.3的碳酸鹽緩沖液）無水Na2CO3 0.1696g NaHCO3 0.2856g SW 100ml *溶解至4℃,一周內(nèi)使用
2）PBST配方 NaCl 8.0g Na2HPO4.12H2O 2.9g KCl 0.2g KH2PO4 0.24g TW-20 0.5ml SW 1000ml
3)底物緩沖液 Na2HPO4 3.682g 檸檬酸 1.02g DW 200ml 不需滅菌，4℃保存
4）3% H2O2 30%H2O2 100ml SW 900ml
5）顯色劑 底物緩沖劑 10ml 3%H2O2 150ul OPD 15mg 其中H2O2 zui后加
6）終止液 濃硫酸：SW = 1:8 濃硫酸緩慢加入到SW 中，并攪拌散熱
1 包被：所謂37℃反應(yīng)，一般取一個(gè)37℃的水浴鍋，在水面放一較大泡沫板，將ELISA板臵于泡沫板上即可，其余步驟的37℃反應(yīng)操作同此； 整個(gè)ELISA過程中所有需要較長時(shí)間等待的步驟（包被、封閉、加一抗孵育、加二抗孵育）均需要將ELISA包起來再放入冰箱或水浴鍋中，一般可直接用一次性EP手套套起來即可。
2 洗滌：zui常規(guī)的洗滌步驟是洗滌3次，每次間隔5min，具體實(shí)驗(yàn)可能會微調(diào)，洗滌次數(shù)可以3-6次不等，間隔5-10min不等； 每次洗滌后要將ELISA板盡可能拍干后在進(jìn)行下一步操作，尤其是每個(gè)洗滌步驟的zui后一次洗滌要盡可能拍干，拍干可在紗布、吸水紙上進(jìn)行，也可以購買洗板機(jī)。
3 顯色：配制顯色液時(shí)3%過氧化氫一定要zui后加入，加入混勻后立刻分裝到ELISA板中，即在加過氧化氫前要*完成洗滌的操作； OPD一般在倒數(shù)第二次洗滌前加入，要留有約10min時(shí)間以確保OPD*溶解。
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