ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

（一）　原理

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

（二）　操作步驟

方法一　用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃**。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。上海友騰生物傾力為客戶提供上萬(wàn)種科研試劑，提供*、zui全、zui有效的科研試劑產(chǎn)品，質(zhì)量被全國(guó)各大院?？蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可。
 鄭重聲明：請(qǐng)客戶在取材前盡量先與我公司銷售技術(shù)人員溝通，前期的取材直接影響到您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。我們有成套的售前售后服務(wù)，.凡是購(gòu)買公司試驗(yàn)用產(chǎn)品，本公司無(wú)償提供。凡是購(gòu)買本公司elisa試劑盒，本公司免費(fèi)代測(cè)，產(chǎn)品耐用，性價(jià)比好，值得信賴。
服務(wù)承諾：1.凡在本司購(gòu)買elisa試劑盒的客戶，可享受我司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)及中英文雙版說(shuō)明書(shū)
          2.我司對(duì)售出產(chǎn)品提供完整售后服務(wù),本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
本公司*供應(yīng)科研用elisa試劑盒，價(jià)格合理，確屬質(zhì)量問(wèn)題可包換包退，免除您的后顧之憂。，如有問(wèn)題可與我司業(yè)務(wù)員!我們會(huì)以zui快的速度為你解決一切問(wèn)題，
提供各種種屬、各種系列ELISA試劑盒，于實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究用，不適用于臨床診斷。提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，詳情請(qǐng)您。