人γ干擾素(IFN-γ)實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)
準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二
孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，
混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉，再各取50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各
取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混
勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)
品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，
濃度分別為300ng/L，200ng/L ，100ng/L，50 ng/L， 25ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣
品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣
品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混
勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30（48T 的20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T 的20 倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此
重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人γ干擾素(IFN-γ)實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明

試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值為0.95 以上。
2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%

人γ干擾素(IFN-γ)實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明

亞硫酸鐵瓊脂
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA定量試劑盒
兔兒茶酚胺(CA)ELISA定量試劑盒
小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA定量試劑盒
葡萄糖半固體培養(yǎng)基
小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA定量試劑盒
腸道菌增菌肉湯
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA定量試劑盒
人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA定量試劑盒
大鼠瘦素(LEP)ELISA定量試劑盒
小鼠雌激素(E)ELISA定量試劑盒
牛血小板活化因子(PAF)ELISA定量試劑盒
*麥康凱瓊脂基礎(chǔ),250g培養(yǎng)基
葡萄糖瓊脂
產(chǎn)毒培養(yǎng)基,350ml培養(yǎng)基
人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA定量試劑盒

人γ干擾素(IFN-γ)實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明