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細(xì)胞培養(yǎng)液主要成分介紹
點(diǎn)擊次數(shù):2022 發(fā)布時(shí)間:2017-2-17
培養(yǎng)植物細(xì)胞要用組織培養(yǎng)液。不同植物要求不同。養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞也有區(qū)分。如果養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞一般需要小牛血清和特定的培養(yǎng)基。而且也需要CO2培養(yǎng)箱等設(shè)施。養(yǎng)酵母的話,一般的酵母發(fā)酵液就可以了。
實(shí)驗(yàn)室常用的細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽、維生素和微量元素等。為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)液中一般有一個(gè)pH緩沖系統(tǒng),同時(shí)常加入少量的酚紅作為pH指示劑。另外培養(yǎng)液中一般需要加入一定量的血清。
培養(yǎng)液中的氨基酸除了13種細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的氨基酸外,往往加入一些非必需的氨基酸以促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)。在必需的氨基酸中,L-*在溶液中不穩(wěn)定(在4℃培養(yǎng)溶液中半衰期為3個(gè)星期,37℃中為1個(gè)星期),需要在使用時(shí)加入。
葡萄糖在培養(yǎng)液中的含量一般為1g/L(低糖)或4.5g/L(高糖)。它是細(xì)胞代謝重要的能量來(lái)源。
細(xì)胞培養(yǎng)液中都有一個(gè)平衡鹽系統(tǒng),用于維持細(xì)胞的滲透壓、維持pH和細(xì)胞正常的代謝等。zui常用的平衡鹽系統(tǒng)有Dulbecco's phosphate buffered saline (D-PBS); Earle's balanced salts (EBSS) 和 Hanks' balanced salts (HBSS)。它們都含有細(xì)胞所必需的5種離子:鈉離子、鉀離子、鈣離子、鎂離子和磷酸根。培養(yǎng)液中的pH緩沖系統(tǒng)一般是*和HEPES等。培養(yǎng)液中的維生素包括*、維生素B、*和吡哆醇等。培養(yǎng)液中的微量元素元素包括Cu2+ ,Zn2+ ,和Mn2+等。血清中含有生長(zhǎng)因子、促進(jìn)細(xì)胞帖壁的因子、礦物質(zhì)、激素、脂類等,另外血清可以抑制*的活性。
一般培養(yǎng)液都含酚紅作為pH指示劑,它是細(xì)胞培養(yǎng)液狀態(tài)的一個(gè)很好的標(biāo)志。過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng)或者微生物的污染都會(huì)使培養(yǎng)液的pH發(fā)生改變。需要注意的是,酚紅可以模擬類固醇激素(尤其是雌性激素)的作用,所以如果培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)雌性激素敏感(比如實(shí)驗(yàn)本身就是研究雌性激素對(duì)細(xì)胞的作用),就應(yīng)當(dāng)使用沒(méi)有酚紅的培養(yǎng)液。