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斑馬魚雌二醇（E2）酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說明書
最近更新時間：2016-12-7
提 供 商：上海滬宇生物科技有限公司資料大?。?/span>105KB
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操作步驟
- 標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
120 pmol/L | 5號標(biāo)準品 | 150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
60 pmol/L | 4號標(biāo)準品 | 150μl的5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
30 pmol/L | 3號標(biāo)準品 | 150μl的4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
15 pmol/L | 2號標(biāo)準品 | 150μl的3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
7.5 pmol/L | 1號標(biāo)準品 | 150μl的2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月