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血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)使用說(shuō)明

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血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)使用說(shuō)明

實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)水平。用純化的
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依
次加入血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF),再與HRP 標(biāo)記的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)抗體
結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP
酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)
皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)
準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)濃度。

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計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

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