谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)elisa原理說明 廣銳生物-國內(nèi)高、優(yōu)Elisa試劑盒供應(yīng)商

用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)的含量。
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)水平。用純化的小鼠谷
丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入谷丙轉(zhuǎn)氨
酶（ALT)，再與HRP 標(biāo)記的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，
經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下
轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm
波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)濃度。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)elisa原理說明

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谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)elisa原理說明

樣本處理及要求：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上
清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，
離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再
次離心。
3.尿液：用無菌管收集，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中
如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/
分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃
度達(dá)到100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分鐘
左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
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5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?BR>用。標(biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將
標(biāo)本勻漿充分。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，
其余冷凍備用。

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