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卡邁舒（上海）生物科技有限公司
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更新時間：2018-03-25 03:07:53瀏覽次數(shù)：163次
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卡邁舒（上海）生物科技有限公司專業(yè)提供人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒,種屬齊全，指標(biāo)成千上萬種,質(zhì)量好發(fā)貨及時，穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠高,特異性強(qiáng)，優(yōu)秀的技術(shù)團(tuán)隊(duì)竭誠為您服務(wù),為全國科研機(jī)構(gòu)、高校和科研人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，在保證產(chǎn)品質(zhì)量的同時，我司還配有扎實(shí)的售后技術(shù)咨詢和服務(wù)，咨詢。
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樣品收集、處理及保存方法：
對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的zui終濃度為1mM。
2. 對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍（如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗）。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會被裂解。
對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量說明：通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。
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