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Sp Fungal DNA Midi Kit(25)*

時(shí)間:2014-9-15閱讀:6997
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DNA 分子在瓊脂糖凝膠中泳動(dòng)時(shí)有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)。 DNA 分子在高于等電點(diǎn)的 pH 溶液中帶負(fù)電荷,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。由于糖 - 磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上的重復(fù)性質(zhì),相同數(shù)量的雙鏈 DNA 幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速度向正極移動(dòng)。

制備瓊脂糖凝膠Sp Fungal DNA Midi Kit(25)

.稱(chēng) 1. 2g 瓊脂糖,加 100ml 電泳緩沖液( 1×TAE )加熱熔化,取出搖勻,即為 1. 2% 的凝膠。

2. 當(dāng)膠液冷至 60 時(shí),加 EB10μ,小心混勻,緩慢倒入制膠模具中,在膠一端插上梳子。

.待膠凝固后,撥出梳子,將模具置于電泳槽中,加入 1×TAE ,讓液面高于膠面 2 -3mm 。

.取 4ul 質(zhì)粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混勻,用加樣器吸取樣品。加入點(diǎn)樣孔中,注意加樣器吸頭應(yīng)恰好置于凝膠點(diǎn)樣孔中,不可刺穿凝膠,也要防止將樣品溢出孔外。

.接通電源, 1-5V/cm 電壓,開(kāi)始電泳。Sp Fungal DNA Midi Kit(25)

.當(dāng)溴酚蘭染料移動(dòng)到距離膠前沿 1 -50px 處,停止電泳。

7. 切斷電源后,取出凝膠,在紫外燈( 360nm  312nm  254nm )下或經(jīng)凝膠成像系統(tǒng)觀察或拍照。

堿裂解法提取質(zhì)粒是根據(jù)共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒 DNA 與線性染色體 DNA 在拓?fù)鋵W(xué)上的差異來(lái)分離它們。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 這個(gè)狹窄的范圍內(nèi),線性的 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而被變性,盡管在這樣的條件下,共價(jià)閉環(huán)質(zhì)粒 DNA 的氫鍵會(huì)被斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈彼此相互盤(pán)繞,仍會(huì)緊密地結(jié)合在一起。當(dāng)加入 Ph4. 8 的乙酸鉀高鹽緩沖液恢復(fù) pH 至中性時(shí),共價(jià)閉合環(huán)狀的質(zhì)粒 DNA 的兩條互補(bǔ)鏈仍保持在一起,因此復(fù)性迅速而準(zhǔn)確,而線性的染色體 DNA 的兩條互補(bǔ)鏈彼此已*分開(kāi),復(fù)性就不會(huì)那么迅速而準(zhǔn)確,它們纏繞成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過(guò)離心,染色體 DNA 與不穩(wěn)定的大分子 RNA 、蛋白質(zhì) -SDS 復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。

Sp Fungal DNA Midi Kit(25)相關(guān)產(chǎn)品系列表:

xy-E10718    人紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒96t/48t    Human Erythropoietin,EPO ELISAkit 

xy-E10719    人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒96t/48t    Human Erythropoietin receptor,EPOR ELISAkit

xy-E10720    人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒96t/48t    human β-tubulin,TUBB ELISAkit 

xy-E10721    人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒96t/48t    Human Prostaglandin F2α,PGF2α ELISAkit

xy-E10722    人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒96t/48t    Human total prostate s pecific antigen,tPSA ELISAkit

xy-E10723    人抗人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒96t/48t    Human anti-immunodeficiency virus antibody,HIV ELISAkit

xy-E10724    人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒96t/48t    Human Ureaplasma urealyticum antibody,UU-Ab ELISAkit

xy-E10725    人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒96t/48t    Human complex edprostate specific antigen,cPSA ELISAkit

xy-E10726    人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒96t/48t    Human Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISAkit

xy-E10727    人細(xì)菌性陰道病(BV)ELISA試劑盒96t/48t    Human bacterial vaginosis,BV ELISAkitSp Fungal DNA Midi Kit(25)

xy-E10728    人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒96t/48t    Human Herpes simplexvirusⅠantibody,HSVⅠAb ELISAkit

xy-E10729    人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 ELISA試劑盒96t/48t    Human Estrogen-induced protein pS2 ELISAkit

xy-E10730    人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒96t/48t    Human papillomavirus IgM,HPV-IgM ELISAkit

xy-E10731    人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒96t/48t    human papillomavirus IgG,HPV-IgG ELISAkit

xy-E10732    人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒96t/48t    Human Herpes simplex virus 2,HSV-Ag2 ELISAkit

xy-E10733    人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒96t/48t    Human Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISAkit

xy-E10734    人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒96t/48t    Human prostate specific antigen,PSA ELISAkit

xy-E10735    人磷脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒96t/48t    Human phosphatidylserine,PS ELISAkit

xy-E10736    人膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒96t/48t    Human choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISAkit

xy-E10737    人總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒96t/48t    Human Total bile acide,TBA ELISAkit

xy-E10738    人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒96t/48t    Human Apolipoprotein C3,Apo C3 ELISAkit

xy-E10739    人膽固醇(CH)ELISA試劑盒96t/48t    Human cholesterol,CH ELISAkit

xy-E10740    人金屬硫蛋白2(MT2)ELISA試劑盒96t/48t    Human Metallothionein 2,MT2 ELISAkit 

xy-E10741    人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA試劑盒96t/48t    Human Soluble Lectin-like oxidized low 

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