優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。 

植物維生素D2(VD2)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考實(shí)驗(yàn)-標(biāo)本的采取和保存

　　可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

植物維生素D2(VD2)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考實(shí)驗(yàn)-標(biāo)本的采取和保存

　　血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來?？梢哉f在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。

植物維生素D2(VD2)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)，洗滌：洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下：

　?。?）浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；b.用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去）；c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次（或按說明規(guī)定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。

　　微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。

　?。?）流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。

植物維生素D2(VD2)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考相關(guān)產(chǎn)品展示：hz-0482E    人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0483E    人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0484E    人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0485E    人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0486E    人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0487E    人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0488E    人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0489E    人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0490E    人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA kit      血清/組織/尿液
hz-0491E    人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA kit      血清/組織/尿液
hz-0492E    人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0493E    人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0494E    人抗IgE受體抗體ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0495E    人抗IVIgG抗體ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0496E    人抗心肌抗體(AMA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0497E    人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0498E    人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0499E    人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0500E    人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0501E    人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA kit      血清/組織/尿液
hz-0502E    人抗胰蛋白酶(AT)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0503E    人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0504E    人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0505E    人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0506E    人甲狀腺抗體(TAb)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0507E    人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0508E    人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0509E    人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0510E    人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0511E    人抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0512E    人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0513E    人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0514E    人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0515E    人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0516E    人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0517E    人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0518E    人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0519E    人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0520E    人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0521E    人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0522E    人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0523E    人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA kit     血清/組織/尿液
hz-0524E    人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA kit     血清/組織/尿液