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動物細胞培養(yǎng)的條件
一般來說,人肝癌細胞 Hep3b細胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質:細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:人肝癌細胞 Hep3b細胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
培養(yǎng)的過程:
下面介紹動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較
比較項目 | 植物組織培養(yǎng) | 動物細胞培養(yǎng) |
原理 | 植物細胞的全能性 | 細胞的增殖 |
培養(yǎng)基的物理性質 | 固體 | 液體 |
培養(yǎng)基的成分 | 營養(yǎng)物質、激素 | 營養(yǎng)物質、動物血清等 |
培養(yǎng)結果 | 培育成新的植株或組織 | 培育成細胞系或細胞株 |
培養(yǎng)的目的 | 快速繁殖無病毒植株等 | 獲得細胞產物或細胞等 |
取材 | 植物幼嫩部位或花藥等 | 動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織 |
其他條件 | 均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件 |
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