血清是細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要的元素之一。因此，上海萬(wàn)疆生物特別整理了一些實(shí)驗(yàn)室里常會(huì)遇到的問(wèn)題，供大家參考：

1、保存血清的方法是什么？

建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。但是，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。反復(fù)凍融會(huì)對(duì)血清的品質(zhì)造成不良影響。

2、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

3、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?

由于GIBCO血清在過(guò)濾之前，沒(méi)有經(jīng)過(guò)預(yù)老化(pre-aged)處理，所以在解凍過(guò)程（包括沒(méi)有*解凍）或儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等）可能會(huì)聚集成團(tuán)，形成絮狀沉淀或外觀混濁；在運(yùn)輸過(guò)程中，由于時(shí)間較長(zhǎng)，所以往往有少許解凍，因此也可能稍有沉淀，但這些都不影響血清性能。

若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。

4、何謂熱滅活?

一般是以56℃，30分鐘來(lái)處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。

5、有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱滅活的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

因此萬(wàn)疆生物建議您，若非必須，您可以不做熱滅活處理血清。這樣，不僅節(jié)省您寶貴的時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量。只在做免疫學(xué)研究或培養(yǎng)干細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，才推薦做熱滅活。萬(wàn)疆生物也有已經(jīng)熱滅活的血清可供選擇。

6、如何減少沉淀物的產(chǎn)生?

建議您在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作:

解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃ 至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至 37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，則毋須做此步驟。

若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。