蔗糖（sucrose）含量試劑盒說(shuō)明書

For Research Use only

僅供研究用

貨號(hào)：QYS-234055

分光光度法 50 管/48 樣

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

蔗糖是植物光合作用的主要產(chǎn)物，也是糖分運(yùn)輸和儲(chǔ)藏的主要形式。因此，測(cè)定蔗糖含量對(duì)于植物糖代謝具有重要意義。此外，蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。

測(cè)定原理：

先用堿與樣品共熱，破壞其中的還原糖。然后在酸性條件下將蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖進(jìn)一步與反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在 480nm 下有特征吸收峰。

所需的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100ml×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 2.5ml×1 瓶，4℃保存；

試劑三：液體 40ml×1 瓶，4℃保存；

試劑四：液體 10ml×1 瓶，4℃保存；

試劑五：粉劑 0.5g×1 瓶，常溫保存。

蔗糖提?。?/span>

稱取 0.1~0.2g 樣本，常溫研碎，加入 1mL 提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到離心管中，置于

80℃水浴鍋中 10min，振蕩 3~5 次，冷卻后，4000g，25℃離心 10min，取上清，加入 2mg試劑五，80℃脫色 30min，再加入 1mL 提取液，4000g，25℃離心 10min，取上清液測(cè)定。

測(cè)定操作表（在 1.5mL EP 管中依次加入下列試劑）：

混勻，沸水浴 30min，冷卻后 480nm 處蒸餾水調(diào)零，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管分別記為 A1、 A2 和 A3。

蔗糖含量計(jì)算：

1、按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

蔗糖含量(mg/mg prot)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度建議選用本公司的 BCA 法蛋白含量測(cè)定試劑盒（貨號(hào)：QYS-237014）

2、按照樣品質(zhì)量計(jì)算

蔗糖含量(mg/g 鮮重)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W。 C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1mg/mL；V1：加入樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，2mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

注意：zui低檢測(cè)限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot