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行業(yè)產(chǎn)品
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蛋白裂解液產(chǎn)品簡(jiǎn)介
采用低濃度的緩沖體系和特殊的添加試劑,使樣品快速充分破裂,從而釋放蛋白質(zhì),內(nèi)含作用強(qiáng)烈的蛋白酶抑制劑,從而保證了蛋白的活性和完整,同時(shí)去除酚和糖類(lèi)物質(zhì)。本產(chǎn)品包括裂解液和蛋白酶抑制劑組成。
蛋白裂解液操作步驟
1.根據(jù)樣品重量(1g新鮮或0.2g的干燥的植物樣品加入3mL溶液A、30μL溶液B和30μL溶液C),準(zhǔn)備裂解液放在冰上。
2.把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入裂解液,在冰上靜置(3-4小時(shí)),在這期間取出在渦旋震蕩器上震蕩3-4次, 每次30sec。
3.4℃,12000 rpm(12830g)離心20 min。取上清,分裝凍存。
4.樣品制備完成,進(jìn)行SDS-PAGE,垂直板電泳。
蛋白裂解液注意事項(xiàng)
1.進(jìn)行裂解前時(shí)要加入所提供的蛋白酶抑制劑,否則容易蛋白質(zhì)被降解。
2.裂解液中蛋白樣品不有含較高濃度的去垢劑,可以用非干擾型蛋白質(zhì)定量試劑盒或改良Lowry 法測(cè)定蛋白濃度。
3.植物樣品要盡量研磨充分,否則裂解不*,同時(shí)不要選用含植物纖維較多的植物組織部分作為樣品,干燥的植物所提取的蛋白質(zhì)不能夠保證蛋白質(zhì)的活性。
4.如果植物樣品的量比較少,可以按照比例相應(yīng)減少各種試劑的使用量。
5.使用后,請(qǐng)旋緊瓶蓋,防止溶液揮發(fā)和與空氣的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
6.本試劑只能夠用于體外實(shí)驗(yàn),不能夠用于臨床、治療和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)等,由此產(chǎn)生的后果,概不承擔(dān)責(zé)任。
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