FIBRINOGEN ASSAY(Fib)ELISA 試劑盒 
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                      FIBRINOGEN ASSAY(Fib)ELISA 試劑盒FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：FIBRINOGEN ASSAY(Fib)ELISA 試劑盒

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

FIBRINOGEN ASSAY(Fib)ELISA 試劑盒Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

FIBRINOGEN ASSAY(Fib)ELISA 試劑盒Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or 

calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.

其它產(chǎn)品：

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Rabbit bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit     兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit Osteoprotegerin,OPG ELISA KIT     兔骨保護素(OPG)ELISA KIT     ELISA.     96T/48T
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Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit     兔p53(p53)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
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Rabbit soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit    兔子可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit lipoprotein α,Lp-α ELSIA Kit     兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit     兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit     兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA Kit    兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit nitric oxide synthase,NOS ELISA Kit     兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit     兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA kit     兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit urokinase plasminogen activator,uPA ELISA kit     兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit     兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA kit     兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha,8-epi-PGF2α ELISA Kit    兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit    兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit    兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit neutrophil elastase,NE ELISA Kit    兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit    兔子補體片斷3a(C3a)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA kit     兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
differentiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit    兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠ ELISA Kit    兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit     兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit     兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit    兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit anti-glycoprotein antibody,GP ELISA Kit    兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit    兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit    兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit    兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit     兔子白介素9(IL-9)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit     兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit    兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA Kit     ELISA.     96T/48T
Rabbit Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit    兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit    兔子白介素2(IL-2)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit    兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit nitric oxide,NO ELISA Kit     兔一氧化氮(NO)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T
Rabbit Complement 3,C3 ELISA Kit    兔補體蛋白3(C3)ELISA Kit    ELISA.     96T/48T