試劑盒名稱：大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒
規(guī) 格：48T/96T
品牌：進(jìn)口原裝/分裝/國(guó)產(chǎn)
產(chǎn)品的用途：僅供科研究使用！
價(jià)格：電議,咨詢?cè)诰€客服,或者以郵件形式發(fā)到我司qysw@qiyibio.com。齊一生物科技（上海）有限公司提供大量品牌進(jìn)口原裝、以及穩(wěn)定性強(qiáng)的國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒，性價(jià)比*。歡迎您前來選購(gòu)！
操作步驟大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)開始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1.         加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 100μl（取1μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同標(biāo)記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.         依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
7. 底物請(qǐng)避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。  

大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒其它產(chǎn)品Cable - LED, RGQII    9020329    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Kit, plasticware, Install & TS, CX1    9020314    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Accessory, cooling block housing, Cx2    9020285    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Packaging, transport box, C1x    9020266    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Switch, assembly, lid, Oct06-Nov08, C1x    9020264    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Gas Strut, lid, 200 N, Cxx    9020222    qiagen    德國(guó)    齊一生物
NDV Univ. RT-PCR REAGENT    1061076    qiagen    德國(guó)    齊一生物
MP PCR REAGENT I    1061126    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Peristaltic Pump, 8-channel P7/PK80    9232901    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Computer System, Extended 1 XP    9016643    qiagen    德國(guó)    齊一生物
BR MDx DSP Maint.pro Plasticware Kit, V1    9016560    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Plate Holder Set (2), QNG    9016522    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Rect. Bucket Set (4), with cap    9016513    qiagen    德國(guó)    齊一生物
WashHead, 8-fold    9016433    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Computer, extended, XP    9016310    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Upgrade kit  W-Drive, BR 8000 I    9016269    qiagen    德國(guó)    齊一生物
PCB 4 - Connection, PyroQ96    9019180    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Mixer module, PyroQ96MD    9019174    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Peltier module, PyroQ96    9019173    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Holder, tip rack 2, accessory unit    9011886    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Tip change system, BR8000    9011853    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Installation, BR plus 2 integrations    9237083    qiagen    德國(guó)    齊一生物
SlideShett,  SamTrak MDx    9236941    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Fan - peltier, PyroQ96ID    9019124    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Fan - rear, PyroQ96ID    9019117    qiagen    德國(guó)    齊一生物
PyroMark Thermoplate Low, PyroQ96ID    9019070    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Plunger unit, EZ1xl    9019009    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Magnet unit, w reflector, EZ1xl    9019007    qiagen    德國(guó)    齊一生物
QX, Air compressor    9018962    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Adapter, MagNa Pure LC 32-Well Plate    9018943    qiagen    德國(guó)    齊一生物
Lid, Silver, DML3000    9022711    qiagen    德國(guó)    齊一生物