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動(dòng)物組織樣本的前處理

時(shí)間:2015-9-14閱讀:155
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一、勻漿介質(zhì)的制備:

一般采用pH 7.40.01mol/L Tris-HCl1mmol/L EDTA-2Na0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。

二、組織勻漿的制備

1、取組織塊(0.1g~0.2g)zui少可到25mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。

2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。

3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機(jī)器勻漿,超聲粉碎。

① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。

② 機(jī)器勻漿:用組織搗碎機(jī)10000~15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機(jī)制備(勻漿時(shí)間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進(jìn)行),皮膚、肌肉組織等可延長(zhǎng)勻漿時(shí)間。

③ 超聲粉碎:用超聲粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細(xì)胞破碎,也可用國(guó)產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復(fù)3~5次。

        鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以),顯微鏡下觀察細(xì)胞是否破碎,若沒有則可延長(zhǎng)勻漿時(shí)間。

4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進(jìn)行測(cè)定.

、樣本保存:

        動(dòng)物組織樣本暫時(shí)不測(cè)定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如*凍融,-20℃以下可保存三個(gè)月,-70℃以下可保存六個(gè)月。

        制備好的勻漿液建議不要凍存,當(dāng)天進(jìn)行測(cè)定,如放置時(shí)間過長(zhǎng)相關(guān)酶活會(huì)有所下降,部分指標(biāo)4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測(cè)定可存5~7天等)


產(chǎn)品:

CAS:529-53-3,高黃芩素標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
老鸛草素標(biāo)準(zhǔn)品,cas:60976-49-0對(duì)照品
精噁唑禾草靈標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
CAS:133408-50-1,(E)-苯氧菌胺標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
噻苯唑標(biāo)準(zhǔn)品|對(duì)照品,cas:148-79-8
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
天花粉(栝樓)對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
鈧標(biāo)準(zhǔn)溶液,cas:7440-20-2
甘草(甘草)對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
羅*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
CAS:126054-77-1,蒼術(shù)苷A標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
CAS:67-20-9,*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
青蒿素對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
木蘭箭毒堿標(biāo)準(zhǔn)品,cas:6801-40-7對(duì)照品
*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
CAS:2883-98-9,α-*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
CAS:93-71-0,草毒死標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
柔*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
大豆皂苷Ba標(biāo)準(zhǔn)品,cas:114590-20-4對(duì)照品
CAS:65-19-0,鹽酸育亨賓標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
土牛膝對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
藍(lán)萼甲素標(biāo)準(zhǔn)品,cas:79498-31-0對(duì)照品
*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
朝藿定B標(biāo)準(zhǔn)品,cas:110623-73-9對(duì)照品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
對(duì)特辛基*(POP)標(biāo)準(zhǔn)品|對(duì)照品,cas:140-66-9
CAS:20229-56-5,繡線菊甙標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
可的松對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
二*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
紫草茸對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
芒果苷標(biāo)準(zhǔn)品,cas:4773-96-0對(duì)照品
D-甘露糖標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
鹽酸貝那替嗪對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
車葉草苷酸標(biāo)準(zhǔn)品,cas:25368-11-0對(duì)照品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
CAS:4373-41-5,山楂酸標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
六氟異丙醇對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
4-甲氧基水楊醛對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
CAS:24880-45-3,二十二碳五烯酸標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
Primulic Acid 2標(biāo)準(zhǔn)品,cas:208599-88-6對(duì)照品
馬來酸*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*δ-3異構(gòu)體對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
CAS:940-31-8,苯氧丙酸標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
馬勃標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
升麻酮標(biāo)準(zhǔn)品,cas:31222-32-9對(duì)照品
*雜質(zhì)Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
EPA氯代烴Mix2標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
*三水合物對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
濱蒿內(nèi)酯對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
披麻草對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
連翹苷標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
蟲草素對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
濱蒿內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品,cas:120-08-1對(duì)照品
*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
歐當(dāng)歸內(nèi)酯A對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
低分子量肝素標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
丙酰丙嗪標(biāo)準(zhǔn)品|對(duì)照品,cas:7681-67-6
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
2-氯-4-硝基苯胺對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
薤白對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
甲磺酸*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
二氫醉椒素標(biāo)準(zhǔn)品,cas:587-63-3對(duì)照品
莪術(shù)醇對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
淫羊藿(淫羊藿)標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
CAS:344911-90-6,遼東楤木皂苷X標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
*鈉標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
番瀉苷C標(biāo)準(zhǔn)品,cas:37271-16-2對(duì)照品
CAS:78417-26-2,5,7,3'-三羥基-6,4',5'-*氧基黃酮標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
補(bǔ)骨脂對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
表兒茶素標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
*分子量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
碘標(biāo)準(zhǔn)溶液,cas:7553-56-2
榿木酮標(biāo)準(zhǔn)品,cas:33457-62-4對(duì)照品
五味子酯乙標(biāo)準(zhǔn)品,cas:58546-55-7對(duì)照品
*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
CAS:55869-99-3,山莨菪堿標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
CAS:35065-27-1,2,2,4,4,5,5-六氯聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
刺梨果對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
*標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
藤黃酸B標(biāo)準(zhǔn)品,cas:5304-71-2對(duì)照品
D-*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
CAS:135095-52-2,山茶苷A標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
乙酰升麻新醇-3-O-α-L-阿拉伯糖苷標(biāo)準(zhǔn)品,cas:402513-88-6對(duì)照品
安五脂素對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
CAS:7439-88-5,銥標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品價(jià)格
白花蛇舌草對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
夏天無對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
鹽酸*對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品
CAS:16290-07-6,山柰酚-7-O-葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
美他環(huán)素對(duì)照品/標(biāo)準(zhǔn)品

4-4對(duì)照品    

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