您好, 歡迎來到環(huán)保在線! 登錄| 免費(fèi)注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置: 江蘇綠葉生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>CRISPR編輯iPS細(xì)胞的脫靶情況
CRISPR基因編輯和iPS重編程是近年來的兩大熱點(diǎn)技術(shù)。CRISPR/?Cas9已經(jīng)在多個領(lǐng)域中展現(xiàn)了自己強(qiáng)大的特異性基因靶標(biāo)能力。而iPS重編程在構(gòu)建疾病模型和新藥開發(fā)中有著很高的應(yīng)用價值。將CRISPR應(yīng)用到iPS細(xì)胞中去,似乎是一件大勢所趨的事情。
在人iPS細(xì)胞中進(jìn)行了CRISPR基因編輯。將全基因組測序和靶向深度測序結(jié)合起來,評估了?Cas9編輯iPS細(xì)胞時的脫靶效應(yīng),還鑒定了一個影響Cas9特異性的單核苷酸變異(SNV)。
Cas9核酸酶的潛在脫靶效應(yīng),一直是CRISPR技術(shù)用于臨床的一個主要障礙。為此,研究人員通過CRISPR/?Cas9系統(tǒng)在人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)中敲除了Tafazzin基因,效率達(dá)到54%。
上海隆壘生物科技有限公司對?Cas9編輯過的人類iPSC進(jìn)行了全基因組測序,結(jié)果并未發(fā)現(xiàn)顯著的基因組改變或突變率提高。研究人員還深度測序了計算機(jī)模擬的Cas9脫靶位點(diǎn),進(jìn)一步驗證了?Cas9的高特異性。
上海隆壘生物科技有限公司研究人員發(fā)現(xiàn),常見的生殖細(xì)胞系單核苷酸變異(SNV),會生成脫靶位點(diǎn)影響基因編輯的特異性。他們對人類基因組的這種SNV進(jìn)行了評估,發(fā)現(xiàn)它生成脫靶位點(diǎn)的可能性大約為1.5–8.5%。據(jù)介紹,這種SNV的突變率并不高,可能也不會產(chǎn)生功能性影響。
上海隆壘生物科技有限公司研究為人們展示了用CRISPR/?Cas9在iPS細(xì)胞中進(jìn)行高特異性基因編輯的可行性。文章指出,在設(shè)計CRISPR編輯之前*行全基因組測序是很有價值的。
發(fā)表了*直接基因組測序方法,該文章中的一些策略現(xiàn)在仍應(yīng)用在二代測序技術(shù)中。此外,如今的多重化分子技術(shù)和條碼式標(biāo)簽也是他發(fā)明的。Church還是納米孔測序技術(shù)的之一。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。